cromatografia

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA SEDE ORINOQUIA
EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DE PIGMENTOS AROMÁTICOS
(CROMATOGRAFÍA POR COLUMNA)

RONALD DAVID HERNANDEZ 1
YAMITH VARGAS LEMUS2

1 Estudiante de Ingeniería Química UN-Sede Orinoquia km 9 vía caño Limón Arauca. rhhernandezm@unal.edu.co
2 Estudiante de Ingeniería Química UN-Sede Orinoquia km 9 vía caño Limón Arauca. hyvargasl@unal.edu.coRESUMEN

En el trabajo realizado de extracción y separación de pigmentos aromáticos se utilizo la cromatografía por columna y posteriormente la cromatografía a capa fina  

Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b(verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones. Todas estassustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separación cuando una solución de las mismas desciende por a través de una columna de cromatografía verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico, ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que éste desciende. Las menossolubles avanzarán menos en la columna. Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo del material utilizado)que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseerán diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución. En la práctica se extrajeron estasclorofilas al primero hervir en agua las espinacas para retirar el almidón, después sé extrajeron con una mezcla de metanol y éter di etílico las clorofilas y por medio de una extracción líquido-líquido con éter de petróleo clorofilas y carotenos con ayuda de una solución sobresaturada de NaCl para evitar emulsiones y obtener las 2 fases. Una vez extraídos los pigmentos fotosintéticos, se procedió arealizar una cromatografía de adsorción para separar las distintas clorofilas que componen dichos pigmentos fotosintéticos que componen las coloraciones de las hojas de las plantas observándose que estas se iban corriendo por la columna dependiendo de la afinidad que tuvieran por el disolvente y se obtenían en diferentes cantidades de acuerdo al trípode clorofila, ya que por ejemplo se obtuvo enmayor cantidad la clorofila alfa debido a que esta es la que compone casi el 75% de las clorofilas de la plantas.





INTRODUCCIÓN

La clorofila es un pigmento que reside en las plantas, les proporciona un color verde y es la responsable de absorber la luz necesaria para la fotosíntesis, proceso con el cual las plantas obtienen energía; la clorofila absorbe



principalmente la luzvioleta, roja, azul y refleja la luz verde; en estudios donde se analizo la clorofila de varias plantas (algas) se determinó que existen varios tipos de clorofila, con base a esto se decidió realizar la extracción de pigmentos vegetales de la espinaca con el fin de observar los tipos de clorofila posibles en la planta, para ello se utilizo la cromatografía.

La palabra cromatografía significa“escribir en colores”, es un proceso de separación de dos compuestos químicos en un medio. Permite la separación y determinación de cantidades de dos o más componentes, posee una fase móvil y una fase estacionaria. Existen varios tipos de cromatografía, de las cuales tenemos la cromatografía por columna y la cromatografía de capa fina.

La cromatografía por columna se emplea una columna de vidrio,que posea una llave en la parte inferior para regular el flujo de la fase móvil, las columnas poseen un agente absorbente que puede ser alúmina o gel de sílice con la disolución a separar, mientras en la parte superior se agrega la disolución que actuara como fase móvil, y arrastrara los componentes menos polares de la muestra, se puede aumentar el grado de polaridad de la solución y así...