cromatografia

Cromatografia
La cromatografía engloba a un
conjunto de técnicas basadas en la
separación de los componentes de una
mezcla y su posterior detección.

Fundamento
Las técnicas cromatográficas son muy variadas, pero
en todas ellas existe:
una fase móvil: un fluido (gas, líquido o fluido
supercrítico) que arrastra la muestra a través de
Una fase estacionaria: un sólido o un líquido fijadoen un sólido.

Fundamento
Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta
forma con la fase estacionaria y con la fase móvil:
Adsorción: El soluto se adsorbe en la superficie de las partículas
sólidas de la fase estacionaria. Es un fenómeno superficial,
aumentado con la formación de puentes de hidrógeno.
Partición o reparto: El soluto se equilibra entre el líquido de la
faseestacionaria y la fase móvil, por diferencia de solubilidad.
Hasta llegar a un equilibrio
Intercambio iónico: los aniones o cationes se separan en

base a una columna rellena con un intercambiador de
iones ( resina).
Exclusión molecular, filtración o permeación en gel: No
existen interacciones entre la fase estacionaria y el
soluto. Se separa por tamaño de partícula.

De este modo, loscomponentes atraviesan la fase
estacionaria a distintas velocidades y se van
separando.

Fundamento
Después de haber pasado los componentes por la
fase estacionaria y haberse separado pasan por un
detector que genera una señal que puede depender
de la concentración y del tipo de compuesto.

ES NECESARIA OTRA TÉCNICA DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL!!!!
LA CROMATOGRAFÍA SÓLO ES UNA TÉCNICA DESEPARACIÓN

Clasificación
Las técnicas cromatográficas se pueden clasificar
atendiendo
a
la
disposición
de
la
fase
estacionaria:
Cromatografía plana: La fase estacionaria se sitúa sobre
una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas
son:
Cromatografía en papel
Cromatografía en capa fina

Cromatografía en columna: La fase estacionaria se sitúa
dentro de una columna.Según el fluido empleado como
fase móvil se distinguen:
- Cromatografía de líquidos
- Cromatografía de gases
- Cromatografía de fluidos supercríticos

CCF
La principal aplicación de la técnica de cromatografía en
capa fina (CCF) es su utilización para separar los
componentes puros que forman parte de una mezcla.
Esta separación se consigue mediante la diferencia entre
las fuerzas deadhesión de las moléculas de los
componentes a una fase móvil (normalmente, un
disolvente) y a una fase estacionaria (la llamada capa fina,
que puede ser papel o gel de sílice). Esta diferencia se
traduce en un mayor o menor desplazamiento o movilidad
de cada componente individual, lo cual permite su
separación e identificación.
Tiene numerosas ventajas: es rápida, sencilla, barata y
necesita pocacantidad de muestra.

CCF
El disolvente en contacto con la placa de cromatografía,
asciende y arrastra las sustancias a distinta velocidad
según la mayor o menor retención que experimenten.

Cromatografia sobre columna
La separación se produce en el interior de una columna
cromatográfica. Dependiendo del estado de la fase móvil se
distingue:
Cromatografía Gas- Líquido

Fase móvil –gas
Fase estacionaria - columna

Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC)
Fase móvil – líquido
Fase estacionaria - columna

Etapas:
Inyección de la muestra
Transporte de la muestra por el interior de la
columna
Separación de sus componentes
Detección de los componentes
Identificación y/o Cuantificación de cada
componente
CROMATOGRAMA

Cromatografia de gases
Inyección dela muestra
La muestra se inyecta con un
jeringa a través de un septup de
goma y se vaporiza.
Generalmente 0.1 a 10 µL.
Se controla la temperatura del
horno de inyección.
Sólo el 0.1 a 10 % del volumen
de 0.1 a 2 µL de muestra
inyectada llega a la columna; el
resto se elimina.

Cromatografia de gases
Transporte de la muestra por el interior de la
columna
Columnas empaquetadas...