Cromatografia

CROMATOGRAFÍA
La cromatografía fue descubierta por el botánico ruso, de origen italiano, Mikhaíl Tswett en 1906, pero su uso no se generalizó hasta la década de 1930. Tswett separó los pigmentos de las plantas (clorofila) vertiendo extracto de hojas verdes en éter de petróleo sobre una columna de carbonato de calcio en polvo en el interior de una probeta. A medida que la disolución vafiltrándose por la columna, cada componente de la mezcla precipita a diferente velocidad, quedando la columna marcada por bandas horizontales de colores, denominadas cromatogramas. Cada banda corresponde a un pigmento diferente.
La cromatografía (del griego chroma = color, graphos = escritura) es un procedimiento fisicoquímico que permite separar los componentes o sustancias integrantes de una mezcla enmovimiento por adsorción o separación diferencial de estos componentes sobre una superficie estacionaria o inmóvil.
El proceso cromatografico implica la distribución diferencial de un soluto o sustancias adsorbible entre dos fases, una de las cuales esta inmóvil o estacionaria (adsorbente o papel) y la otra móvil (disolventes o portadores).
En la separación cromatográficas, el disolvente, eladsorbente y los componentes de la mezcla que se está separando o resolviendo, interaccionan entre si y por ello constituyen un sistema cromatografíco. La interacción de los elementos de este sistema determina el grado de separación que se consigue en las condiciones de trabajo.
CROMATOGRAFÍA EN PAPEL
Es la separación de las sustancias o componentes de una mezcla por migración diferencial sobre lasuperficie del papel filtro. El equipo de la cromatografía en papel es sencillo y económico; la técnica es simple y útil para la separación de muy diversos tipos de compuestos, en particular si son hidrofílicos.
En toda cromatografía, y en particular en la de papel, se intenta conseguir una buena resolución o separación de los componentes de una mezcla y reproducibilidad de los valores de relaciónde flujo (Rf). Es decir que no se superpongan las manchas de cada componente, que estas manchas sean lo más compactas posible y que, con un control mínimo, sean reproducibles las velocidades con que se mueven las sustancias y el frente del disolvente.
En a cromatografía en papel (cp), de coloca una gota de la muestra a uns 2 o 3 cm del borde de una hoja o tira de papel filtro y se marca el sitio(origen) con un lápiz de grafito. El extremo del papel más próximo al sitio o punto donde se colocó la gota de muestra, debe quedar por fuera de la superficie del disolvente. El recipiente se tapa inmediatamente y se observa el movimiento (ascendente o descendente) del frente del disolvente sobre el papel y las sustancias o componentes de la muestra que se desplazan a diferentes velocidades.TECNICAS DE LA CROMATOGRAFIA EN PAPEL
* El laboratorio debe estar bien ventilado, con temperatura y humedad regulada. Se dispondrá de espacio para las cámaras cromatograficas y de estantes cerrados donde guardar el papel cromatografíco.
* Cada muestra se disuelve en la menor cantidad posible de líquido orgánico volátil en el que su solubilidad es mayo. la disolución debe la concentraciónóptima para que al aplicarla al papel forme u depósito de diámetro pequeño y manchas bien definidas.
* La mancha de la muestra debe tener un diámetro entre 3 y 8 mm. Si la mancha se aplica como raya, su anchura debe ser menor de 3mm. En la cromatografía descendente las muestras se aplican a unos 6cm del borde del papel y en la ascendente a unos 2 o 3 cm del borde. Después de la aplicación se secala mancha con una corriente de aire o con un secador de cabello.
DESARROLLO
A) DESCENDENTE: una vez aplicadas las muestras, la orilla del papel mas próxima al origen se introduce en la cama cromatografica, se fija el papel en al cámara, el disolvente se añade cuidadosamente a la cámara a través de un orificio situado en su parte superior y se deja fluir a velocidad constante a través del...