Cromatografia

Fundamento teórico
La cromatografía es una técnica que se emplea para separar entre si los componentes de una sustancia. Esta técnica fue creada por el botánico ruso Michael Tswett en 1906, el cual llamó a su método cromatografía, palabra griega que significa escritura a color, por que lo utilizo para separar compuestos coloreados. Tswett llevó a cabo una extracción de una mezcla de pigmentos dehojas verdes utilizando éter de petróleo, un disolvente no polar, y descubrió que era capaz de separar los pigmentos al hacer pasar el extracto a través de una columna, un tubo de vidrio rellenado con carbonato de calcio (tiza).Tswett utilizó como detector del experimento la simple observación, ya que los compuestos que separó tenían color y era posible detectar bandas o zonas de distintasmaterias por su color en la columna, demostrando que la clorofila es solo uno de los muchos pigmentos que se encuentran en las hojas de las plantas. A pesar de que el método cromatográfico prometía simplificar la separación desustancias de mezclas complejas, no fue sino hasta finales de la década de los 30 y principio de los 40 cuando se empezó a desarrollar la técnica teniendo este método diversasaplicaciones. En la actualidad la cromatografía se emplea principalmente para separar compuestos incoloros pero el nombre permanece para describir cualquier técnica que se base en los mismos principios. La columna sencilla de Tswett, un tubo vertical de cristal, abierto por su parte superior, rellena de un sólido común donde el eluyente se mueve conducido por su propio peso, ha evolucionado hasta losmodernos equipos que hoy conocemos
Tipos de técnicas cromatograficas y las características de los cromatografos más utilizados
Tipos | Fase móvil | Fase estacionaria |
Cromatografía en papel | Líquido | Líquido (moléculas de agua contenidas en la celulosa del papel) |
Cromatografía en capa fina | Líquido | Sólido |
Cromatografía de gases | Gas | Sólido o líquido |
Cromatografía líquidaen fase inversa | Líquido (polar) | Sólido o líquido
(menos polar) |
Cromatografía líquida
en fase normal | Líquido
(menos polar) | Sólido o líquido
(polar) |
Cromatografía líquida
de intercambio iónico | Líquido (polar) | Sólido |
Cromatografía líquida
de exclusión | Líquido | Sólido |
Cromatografía líquida
de absorción | Líquido | Sólido |
Cromatografía de
fluidossupercríticos | Líquido | Sólido |

Las distintas técnicas cromatográficas2 se pueden dividir según cómo esté dispuesta la fase estacionaria:
* Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas son:
* Cromatografía en papel
* Cromatografía en capa fina
* Cromatografía en columna. La fase estacionaria se sitúa dentro deuna columna. Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:
* Cromatografía de líquidos
* Cromatografía de gases
* Cromatografía de fluidos supercríticos
La cromatografía de gases es útil para gases o para compuestos relativamente volátiles, lo que incluye a numerosos compuestos orgánicos. En el caso de compuestos no volátiles se recurre a procesos denominados de"derivatización", a fin de convertirlos en otros compuestos que se volatilicen en las condiciones de análisis.
Dentro de la cromatografía líquida destaca la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC, del inglés High Performance Liquid Chromatography), que es la técnica cromatográfica más empleada en la actualidad, normalmente en su modalidad de fase reversa, en la que la fase estacionaria tienecarácter no polar, y la fase móvil posee carácter polar (generalmente agua o mezclas con elevada proporción de la misma, o de otros disolvente polares, como por ejemplo metanol). El nombre de "reversa" viene dado porque tradicionalmente la fase estacionaria estaba compuesta de sílice o alúmina, de carácter polar, y por tanto la fase móvil era un disolvente orgánico poco polar. Una serie...