Cromatografia

��C r o m a t o g r a f i l i q u i d a d e a l t a e f i c i e n c i a ( H P L C ; s i g l a s e n i n g l e s ) :

Q u e e s :

L a C r o m a t o g r a f � a l � q u i d a d e a l t a e f i c a c i a o H i g h p e r f o r m a n c e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y ( H P L C ) e s u n t i p o d e c r o m a t o g r a f � a e n co l u m n a u t i l i z a d a f r e c u e n t e m e n t e e n b i o q u � m i c a y q u � m i c a a n a l � t i c a . T a m b i � n s e l a d e n o m i n a a v e c e s C r o m a t o g r a f � a l � q u i d a d e a l t a p r e s i � n o H i g h p r e s s u r e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y ( H P L C ) , a u n q u e e s t a t e r m i no l o g � a s e c o n s i d e r a a n t i g u a y e s t � e n d e s u s o . L a H P L C e s u n a t � c n i c a u t i l i z a d a p a r a s e p a r a r l o s c o m p o n e n t e s d e u n a m e z c l a b a s � n d o s e e n d i f e r e n t e s t i p o s d e i n t e r a c c i o n e s q u � m i c a s e n t r e l a s s u s t a n c i a s an a l i z a d a s y l a c o l u m n a c r o m a t o g r � f i c a .

C o m o f u n c i o n a :

E n l a H P L C , e l c o m p u e s t o p a s a p o r l a c o l u m n a c r o m a t o g r � f i c a a t r a v � s d e l a f a s e e s t a c i o n a r i a ( n o r m a l m e n t e , u n c i l i n d r o c o n p e q u e � a s p a r t � c u l a s re d o n d e a d a s c o n c i e r t a s c a r a c t e r � s t i c a s q u � m i c a s e n s u s u p e r f i c i e ) m e d i a n t e e l b o m b e o d e l � q u i d o ( f a s e m � v i l ) a a l t a p r e s i � n a t r a v � s d e l a m i s m a c o l u m n a . L a m u e s t r a a a n a l i z a r e s i n t r o d u c i d a e n p e q u e �a s c a n t i d a d e s y s u s c o m p o n e n t e s s e r e t r a s a n d i f e r e n c i a l m e n t e d e p e n d i e n d o d e l a s i n t e r a c c i o n e s q u � m i c a s o f � s i c a s c o n l a f a s e e s t a c i o n a r i a a m e d i d a q u e a d e l a n t a n p o r l a c o l u m n a . E l g r a d o d e r e t e n c i � n de l o s c o m p o n e n t e s d e l a m u e s t r a d e p e n d e d e l a n a t u r a l e z a d e l c o m p u e s t o , d e l a c o m p o s i c i � n d e l a f a s e e s t a c i o n a r i a y d e l a f a s e m � v i l .
E l t i e m p o q u e t a r d a u n c o m p u e s t o a s e r e l u i d o d e l a c o l u m n a s e d e no m i n a t i e m p o d e r e t e n c i � n y s e c o n s i d e r a u n a p r o p i e d a d c a r a c t e r � s t i c a d e u n c o m p u e s t o , l o q u e d e t e r m i n a q u e c o m p u e s t o e s , y a q u e l a s p r o p i e d a d e s s o n � n i c a s d e c a d a c o m p u e s t o s e g � n l a f a s e m � v i l y e s t ac i o n a r i a u t i l i z a d a .
S u n o m b r e h a c e r e f e r e n c i a a l a u t i l i z a c i � n d e p r e s i � n p a r a r e a l i z a r e s t e t i p o d e c r o m a t o g r a f � a s , e s t o i n c r e m e n t a l a v e l o c i d a d l i n e a l d e l o s c o m p u e s t o s d e n t r o d e l a c o l u m n a y r e d u c ea s � s u d i f u s i � n d e n t r o d e l a c o l u m n a m e j o r a n d o l a r e s o l u c i � n d e l a c r o m a t o g r a f � a .
L o s d i s o l v e n t e s m � s u t i l i z a d o s s o n e l a g u a , e l m e t a n o l y e l a c e t o n i t r i l o . E l a g u a p u e d e c o n t e n e r t a m p o n e s , s a l e s , o...