CROMATOGRAFIA

CROMATOGRAFIA
La cromatografía es un método físico de separación de dos o más sustancias de una mezcla. El proceso implica la presencia de dos fases, una fase estacionaria fija y una fase móvil.La separación de las sustancias se logra gracias al diferente grado de interacción de los solutos con la fase estacionaria.
* Fase inmovilizada o fase fija es una fase estacionaria que estáinmovilizada sobre un soporte, o en la pared interior del tubo contenedor o columna.
* Fase móvil consiste en la muestra que está siendo separada/analizada.
Factores que influyen
* La cromatografía debellevarse a cabo en un área sin corrientes de aire.
* Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas congrasa o agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequeña escala, éstasdeben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y después dejar secar completamente antes de aplicar la muestra.
* Pureza de los disolventes.
Rf (Factor de retención)
Rf =Recorrido de la muestra
Recorrido del disolvente
El factor de retención sirve para conocer un valor que permite saber que tan rápido se mueve el soluto (la muestra) que se analiza respecto al sistemacromatográfico.
REALIZACIÓN DE LA CROMATOGRAFÍA CIRCULAR
Con el extracto líquido anteriormente preparado se marca en el centro de un trozo cuadrado de papel de filtro de 8 x 8 cm. aproximadamente unamancha circular de muestra de pequeñas dimensiones. Repitiendo la operación después de evaporado el disolvente puede conseguirse una mancha suficientemente concentrada de pequeñas dimensiones. Se colocael papel de filtro sobre un vidrio de reloj, haciendo coincidir la mancha con la vertical del centro del mismo. El centro de la mancha se atraviesa con un hilo de coser que proporciona un contactoentre la mancha y el fondo del vidrio de reloj. Una vez montado este dispositivo se vierte una pequeña cantidad de líquido eluyente en el fondo del vidrio de reloj y se deja fluir por capilaridad el...