Cromatografia

OBJETIVOS

* Conocer la técnica como de cromatografía y los factores experimentales que la afectan
* Comparar la cromatografía con los procesos unitarios utilizados anteriormente en cuanto a la eficacia como métodos de separación y purificación.

CROMATOGRAFIA

La palabra Cromatografía significa Escribir en Colores, porque cuando fue desarrollada los componentes separados erancolorantes. Esta Técnica de separación de componentes de una mezcla está basando en la velocidad de movimiento del soluto a través de un medio poroso (fase estacionaria (F.E) o soporte), arrastrado por un disolvente en movimiento (fase móvil (F.M)). Las moléculas que "prefieren disolverse" en la fase móvil serán eluídas más rápido que las que son preferencialmente solubles en la fase estacionaria y quetienden a quedar retenidas.
El botánico ruso Mijaíl Tswett (19 de mayo 1872 en Asti, Italia - 26 de junio 1919 en Vorónezh) fue un botánico ruso .estableció las ventajas de la técnica, adopto la terminología y definió los procedimientos experimentales básicos para esta técnica, se considera que es el Padre de la Cromatografía. En los años 30 y 40 empezó su desarrollo y aplicación en diferentesprocedimientos de experimentación.

Los fenómenos rectores del proceso de retención y separación son:

* LA ADSORCIÓN: Se encuentra delimitado por la superficie interfacial es decir se refiere a la fijación o retención de la sustancia entre la superficie de las dos fases; se relaciona con fuerzas químicas y físicas que dependen de  la naturaleza de la sustancia absorbida, temperatura,naturaleza del absorbente y concentración.
* LA ABSORCIÓN. Es el fenómeno que determina la retención de una especie química por parte de una masa y depende de la tendencia que tiene ésta a formar mezcla o reaccionar químicamente con la misma.
Clasificación de la Cromatografía 

Existen muchas maneras de clasificar los métodos cromatográficos, según su:

* Fase móvil

* Cromatografía degases que puede ser a través de dos sistemas:
* gas- líquido
* gas-sólido
* Cromatografía líquida donde el eluente es un líquido
* líquido-liquido
* liquido-sólido.
* Por el mecanismo de retención-separación, es decir el tipo de equilibrio implicado en la transferencia de los solutos
* Reparto
* Adsorción
* Exclusión.
* La forma de contacto entre lasfases
* columna o superficie plana.
* Fase estacionaria,
* La dimensionalidad,
* Escala física
* Gradientes.
Técnicas cromatográficos
Según el dispositivo utilizado para conseguir el contacto entre la fase móvil y la estacionaria, se distinguen dos técnicas: |
Columna  | Se usa un tubo cilíndrico  |
Plana: El soporte es una placa plana o los intersticios de un papel  |Capa fina |
| Papel (partición) |

Cromatografía en capa fina. 

    Por este método se pueden analizar mezclas de aminoácidos. La muestra para análisis se aplica por medio de un tubo capilar en la superficie de una capa fina adsorbente en forma de banda, punto o mancha y es adsorbida en la superficie por la acción de fuerzas electrostáticas (Fuerzas de Van der. Waals, puentes dehidrogeno, efectos inductivos, etc.). Los adsorbentes más  utilizados son gel de silica, alúmina, tierra silícea, celulosa y poliamidas. Como soportes del adsorbente se utilizan laminas o placas de vidrio, plásticas o metálicas, algunas placas tienen indicador de fluorescencia : f254 ó f366. 
    La placa seca se coloca en el tanque cromatográfico o cámara, en el cual debe encontrarse saturado el eluente(Fase Móvil líquida).El eluente ascenderá o desplazara por capilaridad en la placa y arrastrará los componentes a lo largo de ésta produciendo “manchas” que representan a los componentes, la separación se da por migración diferencial, es decir que la fase móvil arrastra a las substancias apolares y polares son retenidas por la fase estacionaria dando lugar a la separación. Posteriormente se...