Cromatografia

Proceso de Adsorción
La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del material por la acción de fuerzas electrostáticas (fuerzas de Van der Waals, puentes de Hidrógeno, efectos inductivos, etc). Luego, cuando la capa es expuesta a un flujo por acción capilar, se inicia una competencia de enlaces entre los sitios activos del adsorbente y la substancia con el solvente.Adsorbentes
Los adsorbentes más utilizados en la Cromatografía de Capa Fina son:
* Silica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)
* Óxido de Aluminio ó Alúmina (ácida, neutra ó básica)
* Tierra Silícea ó Kieselguhr
* Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
* Poliamidas
Estos adsorbentes deber tener las siguientes características:
* Tamaño de Partícula
* Volúmende Poro
* Diámetro de Poro
* Área Superficial
* Homogeneidad
* Pureza
Preparación de la Placa Cromatográfica
Se usan como soporte del adsorbente láminas de: Vidrio, Plástico ó Metálicos (ej: Aluminio)
Los tamaños de la placa para TLC convencional son : 20 cm x 20 cm; 10 cm x 20 cm y 5 cm x 2 cm
Hay placas que contienen un indicadorr de Fluorescencia : F254 ó F366.El número que apararece como subíndice nos indica la longitud de onda de excitación del indicador utilizado.
Aplicación de la muestra
La muestra se aplica en la placa según el objetivo: Analítico ó Preparativa en:
* Banda
* Punto ó Mancha
Desarrollo de la Placa
Es un proceso mediante el cual son tranportados a través de la fase estacionaria por la fase móvil.
Detección óVisualización
Si la muestra (mancha) no es coloreada se requiere de métodos que nos permitan visualizar el(los) componente(s) presentes. También se conoce este procedimiento como Revelado.
Estos métodos son:
* Químicos (por inmersión o rociado). Se obtienen derivados coloreados o fluorescentes
* Físicos (ópticos). Generalmente se utiliza radiación UV
Evaluación de un Cromatograma de CapaFina
Análisis Cualitativo
* Medida de Rf
* Comparación Visual de Color/Intensidad
Propiedades V/IR/MS/NMR
La fase estacionaria será un sólido poroso o un líquido retenido en un sólido inerte, de
composición fija , dispuesto en forma de columna (cromatografía en columna, gas-líquido o
líquido-líquido), en forma de placa (capa delgada) o de tira de papel. La fase móvil, es eleluyente y podrá ser líquido o gas.
Cuando la fase fija o fase estacionaria es sólida la cromatografía se llama cromatografía de adsorción, si es líquida recibe el nombre de cromatografía de partición o reparto aún cuando esta fase líquida debe encontrarse sobre un soporte sólido que no suele intervenir en el proceso cromatográfico.

La cromatografía en capa delgada o capa fina (TLC) ("Thin LayerChromatography"), en la que el soporte de la fase estacionaria es un material poroso purulento extendido sobre una superficie de vidrio, plástico o metal, por el que fluye, por capilaridad, la fase móvil; el material poroso puede también actuar como fase estacionaria en la cromatografía de adsorción.

De estos dos tipos de cromatografía plana, el que nos interesa a nosotros en este momento es elestudio de la Cromatografía en capa fina, por lo que en lo que sigue, haremos una amplia descripción de la técnica, teniendo en cuenta que en el caso de la cromatografía en papel, el proceso es similar.

La cromatografía de capa fina, en la separación de sustancias lipófilas, es mucho más ventajosa que la cromatografía de papel. Se empleó este método también, unos años más tarde para laseparación de combinaciones hidrófilas y en algunos casos fue comparado sistemáticamente con la cromatografía de papel, demostrándose que empleando sustancias apropiadas, es tan buena o mejor que aquella.

Las ventajas más importantes de la cromatografía de capa fina son:
Excelente nitidez.
Alta sensibilidad.
Gran rapidez.
Alguna separación, que sobre papel necesita muchas horas, se puede lograr...