cromatografia

UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA NACIONAL
FACULTAD REGIONAL CÓRDOBA

CÁTEDRA DE QUÍMICA ORGÁNICA
- CROMATOGRAFÍA -

6. Cromatografía
6.1. Principios de la cromatografía
Esta palabra proviene del griego croma (color) y grafo (escritura), entonces escritura
de color, y es así ya que primeramente se la utilizó para separar compuestos que tenían color.
Es una técnica de separación basada en lasdiferentes velocidades con que se mueven
los solutos a través de un medio estacionario mediante el flujo en un disolvente llamado
eluente. F. F. Runge químico alemán, describió el proceso de separación que actualmente se
conoce como cromatografía en papel.
Al ruso Mijail Tswett le corresponde el haber establecido las ventajas de la
cromatografía y la adopción parcial de la terminología, tambiénfue quien sentó las bases de
los principales procedimientos experimentales relativos a ésta técnica. A pesar de que el
método cromatográfico prometía simplificar la separación de sustancias de mezclas complejas,
no fue sino hasta finales de la década de los 30 y principios de los 40 cuando se empezó a
desarrollar la técnica teniendo este método diversas aplicaciones. Las únicas sustancias queno
pueden ser examinadas por cromatografía son las insolubles y aquellas que reaccionan o se
descomponen con el solvente o con la fase estacionaria.
6.1.1. Términos que se utilizan
6.1.1.1. Fase Móvil
Es la sustancia (líquido o gas, depende del sistema que se utilice) que se encarga de
arrastrar la muestra a través de la fase estacionaria.
6.1.1.2. Fase Estacionaria
Es la sustancia (sólidoo líquido) sobre la que se adsorberá o disolverá la muestra a
analizar. En otras palabras, es aquella sustancia que se encarga de separar a la mezcla que
estamos cromatografiando de acuerdo a su solubilidad en ella o a su capacidad de ser
adsorbida (retenida).
6.1.1.3. Soporte
Es un compuesto sólido sobre el que se dispersa la fase estacionaria. La principal
característica es tener una gransuperficie (cientos de m2 por gramo). Los más comunes son
tierras de diatomeas y carbón activado. Evidentemente solamente se utiliza en las columnas
empacadas.

S. Caglieri, M. Pagnan, C. Poncio

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6.1.1.4. Flujo
Se denomina de esta forma al caudal de la fase móvil. En lacromatografía gaseosa se
utilizan principalmente: hidrógeno, helio y nitrógeno.
6.1.1.5. Carga
Es el porcentaje de fase estacionaria de las columnas de relleno.
6.1.1.6. Pico
Término aplicado en un cromatograma que exhibe un máximo de concentración, como
una banda o zona.
6.1.1.7. Tiempo de retención y tiempo muerto
El tiempo de Retención es el tiempo que toma un soluto en recorrer toda lacolumna.
El tiempo de retención se asigna al correspondiente pico del soluto. El tiempo de retención es
una medida de la cantidad de tiempo que el soluto gasta dentro de la columna: es la suma del
tiempo que gasta en fase móvil y en la fase estacionaria.

Figura 1: Esquema de un Cromatograma

En la Figura 1 se presenta el esquema de una cromatografía en la que se puede
apreciar losdiferentes tiempos de retención (tR1 y tR2, siendo tR1=tM + t´R1) y además otro
valor que resulta importante como lo es el tiempo muerto o tiempo de retención de un pico
no retenido (tM o to) es el tiempo requerido por un compuesto no retenido para viajar a
través de toda la columna. Las moléculas de un soluto no retenido no penetran a la fase
estacionaria, ellas viajan a la misma velocidad del gasportador, todo el tiempo están en la fase
móvil. Este es equivalente al tiempo que el soluto gasta en la fase móvil y que es el mismo para

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todos los solutos de la muestra en el mismo corrido cromatográfico. Este tiempo se obtiene al...