cromatografia


CROMATOGRAFÍA
En 1906 Tswett definió la cromatografía como:
Método en el cual los componentes de una mezcla son separados en una columna adsorbente dentro de un sistema fluyente.
Recientemente la I.U.P.A.C define la cromatografía de forma más amplia como:
Método usado principalmente para la separación de los componentes de una muestra, en el cual los componentes son distribuidos entredos fases, una de las cuales es estacionaria, mientras que la otra es móvil. La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido soportado en un sólido o en un gel (matriz). La fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna, extendida en una capa, distribuida como una película, etc...

CLASIFICACION DE LOS METODOS CROMATOGRAFICOS

Estos métodos se clasifican atendiendo el estadofísico de las fases, al mecanismo de separación y al tipo de soporte.
En cuanto al aspecto físico de las fases, la móvil puede ser un gas o un liquido, y la estacionaria un liquido o un solido, pudiendo en este sentido establecerse 4 tipos de cromatografía: gas – liquido, liquido – liquido, gas – solido y liquido – solido.
Los mecanismos por los que los diferentes componentes son separadosen proceso cromatográfico son variados y avécese no son suficientes. En algunos casos participa más de un mecanismos en un mismo proceso de separación, pero no es siempre sencillo clasificar las cromatografías atendiendo a este concepto. Los principales mecanismos que intervienen en la separación cromatográficas son:
ABSORCIÓN
Gases o líquidos contenidos en la fase móvil son retenidas poruna absorción selectiva en la superficie del sólido que constituye la fase estacionaria. En la interface solido – fase móvil hay u aumento de concentración respecto a la del seno de la fase móvil. Es el mecanismo que controlo las cromatografías gas – solido y liquido – solido.
REPARTO
Los componentes de la fase móvil, gases o líquidos, son retenidos por la fase estacionaria, liquida, enfunción de la solubilidad en ella, si las fases son liquidas se tienen realmente un proceso de extracción en continuo
INTERCAMBIO IONICO
La fase estacionaria está constituida por un sólido que puede intercambiarse iones propios con iones contenidos en la fase móvil, liquida. El intercambio de iones sólidos – solución está regulado por la afinidad química de los iones con ambas fases y por susrespectivas concentraciones.
TAMAÑO MOLECULAR
Especies neutras de alto peso molecular pueden ser separadas en virtud de su tamaño. La fase estacionaria está formada por un gel hidrofílico altamente poroso que retiene las moléculas de tamaño inferior al de los poros, que difunden dentro de los mismos. Las moléculas de tamaño superior solo son retardadas en su peso por pequeñas fuerzasde absorción de la superficie externa del gel por lo que son rápidamente excluidas de la fase estacionaria
EMIGRACIÓN ELÉCTRICA
Los componentes iónicos de una muestra son separadas por las diferente velocidad y sentido con la que se desplaza en un campo eléctrico, la fase estacionaria suele ser papel saturado con un electrolito la aplicación de un campo eléctrico provoco el movimientodiferencial de los iones dependiendo de su carga y de su movilidad iónica.
En cuanto a los tipos de soporte utilizado las cromatografías pueden ser de columna, de placa(capa fina), y de papel.

CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN EN COLUMNA
Se utilizan columnas de vidrio rellenas de Alúmina (Al2O3), Sílica u Oxido de Magnesio. La fase estacionaria esta constituida por un sólido poroso, el cual quedasoportado en el interior de una columna generalmente fabricada en plástico o vidrio. La fase móvil se encuentra formada por la solución que lentamente va atravesando la fase estacionaria. La solución que sale al final de la columna se reemplaza constantemente por nueva solución que se suministra desde un contenedor por la parte superior de la columna.
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