CROMATOGRAFIA

4.12.4 CROMATOGRAFIA EN PAPEL
La cromatografía en papel es la técnica de separación e identificación de sustancias químicas mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras de papel de filtro.
Se toma una pieza de papel de filtro y cerca de uno de sus extremos se deposita una gota de la solución que contiene la mezcla de las sustancias que se quieren separar. Se deja secar la gota yquedara la mancha de las sustancias mezcladas.
El extremo del papel más próximo a la mancha se introduce en un disolvente apropiado, pero sin que la mancha llegue a introducirse en él.
Existen muchos tipos de cromatografía sobre papel, una primera división de las variadas clases podría ser:
1.- Cromatografía ascendente: el disolvente se encuentra en el fondo del recipiente que sostiene al papel y vasubiendo a través de el por capilaridad.
2.- Cromatografía descendente: el disolvente esta en un recipiente del que cuelga el papel, fluye por él hacia abajo por una combinación de capilaridad y gravedad.
En ambos casos el disolvente avanza a lo largo del papel pasando por encima de la mancha, al avanzar disuelve y arrastra las sustancias de la mancha, cada una de ellas se mueve, por lo generala distinta velocidad que las otras.
Se deja actuar el disolvente un tiempo determinado, se seca el papel y se observan las sustancias separadas si tienen color, o en caso de no tener color se procede al revelado por una reacción química apropiada.
Esta técnica se conoce como cromatografía monodimencional y el papel resultante recibe el nombre de cromatograma monodimencional.

4.12.3CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
En cromatografía en capa fina se utiliza una placa cromarográfica inmersa verticalmete en un eluyente apolar; La placa cromatográfica consiste en una fase estacionaria polar (comunmente se utiliza sílica gel) La fase estacionaria es una capa uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte.
El eluyente debe ser un compuestoliquido apolar, generalmente orgánico. Para realizar la CCF, se debe apoyar la placa cromatografica sobre algun recipiente o camara que contenga la fase líquida a aproximadamente 1 cm (la distancia entre el principio de la placa y la muestra que se desea analizar).
Preparación de la placa.
El adsorbente se deshace en agua destilada. Para mezclar la papilla homogéneamente es preferible agitar demodo mecánico. La porción de adsorbente y de agua depende del tipo de adsorbente. Dos partes de aguan y una de adsorbente pueden tomarse como norma general, no obstante, habrá de consultarse las instrucciones del fabricante.
En general para realizar una separación preparativa de un gramo de muestra es necesario una placa de vidrio de 20 x 20cm., 35 gramos de adsorbente y 80ml de agua destilada.
Laspropiedades de la fase estacionaria pueden alterarse mediante la adición de compuestos tales como disoluciones tamponadoras para mantener para mantener el pH deseado. En la preparación de las placas también se pueden adicionar indicadores fluorescentes o aglomerantes.
La placa debe quedar libre de grumos y rugosidades. Para ello existen en el mercado extensores que se utilizan para crear de formamecánica placas homogéneas del espesor deseado. Si no se dispone de extensor, el proceso a seguir es el siguiente:
1) Mezclar en un matraz elermeyer el agua y el adsorbente.
2) Agitar energéticamente.
3) Extender la papilla sobre el soporte de vidrio
4) Hacer oscilar la papilla de un lado a otro.
5) Golpear con el dedo la parte inferior del soporte.
Se dejan reposar un corto espacio de tiempodespués de cubrirlas; luego se colocan en bandejas metálicas. Puede activarse el agente adsorbente, dejando las placas reposar toda la noche a temperatura ambiente, bien calentándolas durante 30- 60 minutos a 105- 110°C (las placas de celulosa no deben calentarse más de 10 minutos a 105°C) para expulsar así el aire.
MATERIAL
Cubeta de cromatografía (puede usarse un bote de vidrio del tamaño...