Cromatografia

CROMATOGRAFIA

KATHERINE BARRETO
JUAN CAMILO GUTIERREZ
DIEGO FELIPE PULIDO
CAMILO ANDRES JIMENEZ

Contenido
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Introducción a la cromatografía
Cromatografía de papel
Cromatografía en capa fina
Cromatografía liquida
Cromatografía de gases
Cromatografía de Fluidos súper críticos

CROMATOGRAFIA
• Es un método de separación para la
mezclas complejas.
Esta nos permite:
1. Separar loscomponentes de la mezcla,
para obtener los mas puros y que
puedan ser usados de nuevo.
2. Medir la proporción de los
componentes, generalmente las
cantidades son pequeñas.

• La cromatografía fue descrita por Mijaíl Tswett
en el año de 1906.
• Invento un método para separar pigmentos de
las plantas utilizando un tubo de vidrio lleno
de CaCO3.
• Después de añadir un extracto de plantas y
lavarlo con undisolvente orgánico observo
que se separaban diferentes bandas de color
en el interior de el tubo.

Clasificación
De acuerdo a su utilidad:
1. Analítica
2. Preparativa

CROMATOGRAFIA DE PAPEL
• Es un proceso muy utilizado en los
laboratorios para realizar análisis
cualitativos, ya que al no ser una
técnica muy compleja no se requiere
ningún tipo de equipamiento.

Ejemplo

Cromatografía enCapa Fina
La cromatografía en capa fina es una técnica
cromatografíca. La fase estacionaria es una
capa uniforme de un absorbente mantenido
sobre una placa, la cual puede ser de vidrio,
aluminio u otro soporte.

Desarrollo de la cromatografía
El desarrollo de los cromatogramas en capa fina
se realiza normalmente por el método
ascendente, esto es, al permitir que un eluyente
ascienda por una placacasi en vertical, por la
acción de la capilaridad.

Aplicación de las muestras
Los productos a examinar se disolverán, cuando
sea posible, en un disolvente orgánico que tenga
un punto de ebullición lo suficientemente bajo
para que se evapore después de la aplicación, lo
más común es usar acetona

Localización de sustancias
Si los compuestos separados no son coloreados
es necesario revelar laposición de dichos
compuestos, para ello existen dos tipos de
métodos:
- Métodos químicos
- Métodos físicos

Cromatografía Liquida
Es una técnica de separación y no debe
confundirse con una técnica cuantitativa o
cualitativa de análisis.

Método

Abreviatura

Mecanismo predominante

Líquido, sólido o
deadsorción

LSC

Adsorción sobre la
superficie

LLC

Reparto entre fases
líquidas, una móvil y laotra
estacionaria.

BPC

Reparto y / o adsorción
entre las fases móvil y
enlazada.

--

Uso de la estructura de
ligantes inmovilizados para
unir bioselectivamente la
proteína deseada.

Líquido

Fase enlazada

Afinidad

CROMATOGRAFIA
DE GASES

Solido o liquido Sobre Solido (columna)

1-6 m Longitud 2-4 mm diámetro

Fase Estacionaria: aluminio, sílica gel, carbón o tierra de diatomeas

• Cuandola fase estacionaria es un sólido, la
interacción que puede tener con la fase móvil
se puede clasificar en: Adsorción, intercambio
iónico y de filtración sobre geles porosos.
• Cuando es un líquido, la interacción con la
fase móvil recibe el nombre de reparto, esta
última es la forma más usual de hacer
cromatografía de gases.

Tipos de Columnas
Columnas clásicas de relleno
• Longitud 1-10 m
•Diámetro interno 2-4 mm hasta 5 cm en escala preparativa
• Tamaño de la partícula de relleno diez veces menor que el
diámetro del tubo
• Capacidad de carga grande
• Relación de fases pequeña
• Permeabilidad baja
Tubo
Grano de Soporte
Fase estacionaria

Columnas capilares de capa porosa
• Longitud de 25-200 m
• Diámetro interno de 0.1-0.5 mm
• Tamaño de la partícula de relleno varía entre
el de unsoporte clásico y las partículas de
• carbono producidas por la pirólisis de una
sustancia orgánica.
• Permeablilidad valores máximos (al igual que
las capilares abiertas)

Columna Capilares Abiertas
• Longitud hasta 200 m, los más utilizados
varían entre 50-100 m
• Diámetro interno 0.1-0.5 mm
• Capacidad de carga muy pequeña
• Relación de fases es la más alta

Mide soluto en el gas acarreador...