Cromatografia

Cuestionario
1 Cromatografía en capa fina
En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeño espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascenderá,por capilaridad, por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de ésta produciendo “manchas” de los componentes.
En la cromatografía en capa fina (ccf), el grado de elución de las sustanciasdepende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado.
El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rígido, que pueden ser placas de vidrio,aluminio o poliéster. Los tamaños de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x20 y 5×2 cm.
Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la identificación demuestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos, se requerirán otras técnicas de revelado.
Algunos eluyentes más comunes para cromatografía en capa fina son:
-éter de petróleo
– clorurode metileno
– n-hexano
– acetato de etilo
– ciclohexano
– acetona
– iso-propanol
– dietil-éter – etanol
– t-butil-éter
– metanol
– cloroformo
– ácido acético
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Cromatografía de reparto. La faseestacionaria suele ser mantenida fija mediante un soporte inerte poroso (papel o celulosa). La fase móvil suele ser una mezcla de disolventes medianamente miscibles con el agua. Cuanto más soluble enagua sea la sustancia a cromatografiar, más retenida y retrasada quedará en el desarrollo cromatográfico.


- Cromatografía de adsorción. La fase estacionaria retiene con más o menos poder a lasustancias a cromatografiar por un fenómeno de adsorción en superficie. Para ello se utiliza alúmina, gel de sílice, etc. La cromatografía de afinidad es un tipo de cromatografía de adsorción en la que la faseestacionaria tiene afinidad biológica por la sustancia que se quiere separar. Se utilizan así parejas antígeno-anticuerpo, enzima-inhibidor, etc. En la cromatografía de intercambio iónico, la fase...