Cromatografía liquida de alta resolución (HPLC) Determinación de parámetros cromatográficos

Páginas: 10 (2304 palabras) Publicado: 3 de julio de 2014
UNIVERSIDAD DE CHILE
Facultad de Ciencias
Departamento de Química









LABORATORIO N° 1
Cromatografía liquida de alta resolución (HPLC)
Determinación de parámetros cromatográficos







Integrantes:

Bruno Levy
Octavio Cadet
Gonzalo Vargas
Francisco Salgado
Diego Alarcón
Fernando Gatica
Sebastián Linares




Profesora:
Sylvia Copaja

Ayudante:Vesna Nuñes


Métodos cromatograficos y electroquímicos de análisis
Resumen

El presente informe consistió en medir, estudiar y analizar los parámetros cromatograficos que rigen la determinación de los analitos presentes en una muestra, en nuestro caso los analitos a estudiar fueron: la cafeína, la tiourea y fenol todos a distintas velocidades de flujo.
Se determino el tiempo de retención(tR), el tiempo muerto (tM), el ancho de banda (w), el factor de capacidad (K’), el número de platos teóricos (N), la altura del plato (H), el factor de separación (α) y la resolución (Rs).




Introducción

En la actualidad existen diversas y selectivas herramientas para obtener información cualitativa y cuantitativa acerca de la composición y estructura de la materia. Es imprescindibledesarrollar un conocimiento de dichas herramientas y de cómo han de utilizarse para la resolución de los problemas analíticos. La correcta elección y el buen uso de los instrumentos analíticos modernos requiere la comprensión de los principios fundamentales en los que se basan estos sistemas de medida. De esta manera se puede elegir de forma adecuada entre las distintas alternativas para resolver unproblema analítico y valorar las dificultades inherentes a las medidas físicas y establecer un criterio respecto a las limitaciones de las medidas instrumentales en cuanto a la sensibilidad, precisión y exactitud.

El objeto de la química analítica lo constituye la materia, y su finalidad es caracterizarla. Con este fin es necesario utilizar ciertas propiedades (analíticas) que presenta lapropia materia y mediante las cuales se pueda establecer lo más claramente posible su composición cuali o cuantitativa. Estas propiedades pueden ser observadas directamente de la materia o provocadas mediante un proceso físico o mediante una reacción química. La medida de una propiedad elegida es la etapa experimental definitiva en el proceso analítico, tanto si se trata de establecer la presencia oausencia de un determinado grupo químico, como si se trata de determinar la proporción de un determinado componente en una muestra.

La medida puede referirse a la simple percepción sensorial de una propiedad (formación de un precipitado, presencia de un color, etc.) o a la determinación de la intensidad de dicha propiedad con ayuda de un instrumento analítico que actúa como un dispositivo queconvierte una señal, que no suele ser detectable directamente por el ser humano, en una forma que sí lo es.

El presente informe se basa en la utilización de equipos para desarrollar una cromatografía de líquidos de alta eficacia (HPLC), siendo una de las técnicas analíticas de separación más utilizadas en la actualidad por su sensibilidad, fácil adaptación a las determinaciones cuantitativasexactas, capacidad para la separación de especies no volátiles o termolábiles y por sobre todo, su gran aplicabilidad a sustancias que son de primordial interés en la industria y para la sociedad en general.



Los componentes básicos de un sistema para HPLC son:

• Depósitos para la fase móvil.
• Sistema de bombeo para proporcionar presión a la fase móvil.
• Dispositivo para la introducciónde la muestra.
• Columna cromatográfica.
• Detector
• Sistema para el tratamiento de datos y registrado.


Figura 1. Esquema de un aparato de HPLC

El HPLC da el punto de partida para el análisis cromatográfico, en el cual de una manera muy sencilla, entrega los datos de la muestra y con algunos simples cálculos, se pueden obtener los antecedentes para lograr la separación, aislación...
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