Cromatografía plana




Análisis instrumental

Práctica 8

CROMATOGRAFÍA PLANA


Flotte Rivera, Ana Lisa
Villa González, Larissa









PRÁCTICA 8 – CROMATOGRAFÍA PLANA.

8.1 Objetivo
Realizar análisis de dos tipos distintos de cromatografía plana para posteriormente compararlas entre sí en base a los resultados que se obtengan.

8.2 Introducción
La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen comofinalidad la separación de mezclas basándose en la diferente capacidad de interacción de cada componente en otra sustancia. De forma general, consiste en pasar una fase móvil a través de una fase estacionaria fija sólida. La fase estacionaria retrasa el paso de los componentes de la muestra, de forma que los componentes la atraviesan a diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno delos componentes de la mezcla presenta un tiempo característico de paso por el sistema, denominado tiempo de retención. Cuando el tiempo de retención del compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla, éste se puede separar mediante la separación cromatográfica.
Las diversas técnicas para la separación de mezclas complejas se fundamentan en la diversidad de afinidades de lassubstancias por un medio móvil gas o líquido y un medio absorbente estacionario (papel, gelatina, alúmina o sílice) a través del cual circulan.
En la cromatografía plana la fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas de cromatografía plana son:
Cromatografía en capa fina – Se basa en preparación de una capa, uniforme, de un absorbente mantenido sobreuna placa de vidrio u otro soporte. La fase móvil es líquida y la fase estacionaria consiste en un sólido. La fase estacionaria será un componente polar y el eluyente será, por lo general, menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad serán los menos polares.
Cromatografía en papel – La fase estacionaria está constituida simplemente por unatira de papel filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la solución y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad. Esto es, se coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra del lado de abajo dentro de un recipiente que contiene fase móvil en el fondo.
Si el disolvente elegido fue adecuado y lassustancias tienen color propio se verán las manchas de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado.
(Universidad de Barcelona)

8.3 Materiales y equipos
5 tubos de ensaye.
1 pizeta.
1 tubo capilar.
1 placa de vidrio.
1 cámara cromatografía.
1 gradilla.
3 agitadores.
1 espátula.
1 propipeta.
1 pipeta de 1 ml.
2 vasos de precipitado de50 ml y de 100.
2 pipetas volumétricas de 10 y 5 ml.
Estufa secadora memmert.

REACTIVOS
Hexano
Tolueno
Etanol
Acetona
Agua
Sílica
MetOH – Tolueno (9:1)
Tinta rosa
Muestras coloridas.


8.4 Métodos
8.4.1 Cromatografía en papel
1. Se lavó todo el material a utilizar.
2. En los 5 tubos de ensaye se colocó 1.5ml de hexano, tolueno, etanol, acetona y agua, respectivamente.
3. Se cortaron 5 tiras delpapel cromatográfico de 15cmX1cm que fueron marcadas en el origen y el frente del disolvente a 1 cm de cada uno de sus extremos.
4. En las 5 tiras de papel cromatográfico se colocó una gota de tinta de pluma rosa justo en el centro de la línea de origen.
5. Cada una de las tiras se colocó dentro de un tubo de ensaye con un disolvente diferente sin que la muestra llegara a tocarlo.
6. Se dejó quelos vapores del disolvente avanzaran por el papel cromatográfico y se esperó hasta que llegaran a la marca superior para retirarlos y secarlos.
7. Se ubicaron todas las manchas y se midió desde su centro hasta el origen.

8.4.2 Cromatografía en capa fina
1. Se pesaron 10 gr de Sílica y se mezcló con 15 ml de agua destilada.
2. Se hizo una masa muy espesa.
3. Se vació el contenido sobre la placa...