Cromatogragia

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS

FUNDAMENTOS DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL. 7º RELACIÓN DE PROBLEMAS.
1.- Las sustancias A y B tienen tiempos de retención de 16.40 y 17.63 min, respectivamente, en una
columna de 30 cm. Una especie no retenida pasa a través de la columna en 1.30 min. Las anchuras
máximas (en la base) de A y B son 1.11 y 1.21 min, respectivamente.Calcule:
a) la resolución entre los compuestos A y B
b) el número medio de platos de la columna
c) la altura de plato
d) la longitud de la columna necesaria para lograr una resolución de 1.5
e) el tiempo necesario para eluir la sustancia B en la columna que da un valor de RS de 1.5
2.- La figura muestra el cromatograma de una mezcla de dos componentes en una columna
cromatográfica de líquidosempaquetada, de 25 cm. La velocidad de flujo fue de 0.40 mL min-1.
a) Determina los factores de retención para los dos componentes
b) Calcula la resolución de los dos picos
c) Halla la altura media de plato
d) ¿Qué longitud de la columna se necesitaria para alcanzar una resolución de 1.75?
e) Supongamos que la longitud de la columna se ha fijado a 25 cm y que el material de
empaquetamiento estáfijo. ¿Qué medidas podría usted tomar a fin de incrementar la resolución
para lograr la separación en línea base?
f)¿Hay alguna medida que usted pudiera usar para lograr una mejor separación en menos tiempo
con la misma columna que en el apartado anterior?

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3.- El aldehído cinámico es el compuesto del que depende el sabor de lacanela. También es un
antimicrobiano potente, que forma parte de ciertos aceites esenciales. La respuesta de la
cromatografía de gases (CG) con una muestra artificial que contiene seis componentes de aceites
esenciales y metilbenzoato como patrón interno se muestra en la siguiente figura:

La siguiente figura es una ampliación de la región cerca del pico del aldehído cinámico.DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS

Calcula:
a) el número de platos teóricos para el compuesto de estudio.
b) La columna de sílice fundida tiene 0.25 mm x 30 cm de diámetro y longitud de columna
respectivamente, y con un tamaño de partícula de 0.25 µm. Determina la altura de plato teórico.
c) Se obtienen datos cuantitativos empleando metilbenzoato como patrón interno para loscompuestos aldehído cinámico y timol tal y como se muestra en la siguiente tabla. Sabiendo que los
valores de área relativas para cada compuesto se calculan dividiendo el área del pico del
componente/área del patrón interno, calcula: el área relativa para los dos compuestos
anteriormente mencionados, determine las ecuaciones de la curva de calibrado para cada
componente y a partir de los datosdel apartado anterior determina qué componente tiene mayor
sensibilidad.
Área de pico abosluta
Concentración
(µg mL-1)
0.50
0.75
1.30
2.50

Metil
benzoato
18225
18523
17895
18329

Aldehído
cinámico
12325
20140
35462
68090

Timol
20238
36890
69975
130215

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PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS
Señal
Compuesto AtRB
tRA

Compuesto B

Compuesto A

W1/2A

W1/2B

to
WA

WB

Tiempo (min)

Tiempo muerto

1. Tiempo de retención (tR)
2. Factor de capacidad (K’)

K'=

t R − t0
t0

o bien

K'=

VR − VO
V0

3. Selectividad (α) Factor de selectividad, también llamado retención relativa:

α 1, 2 =

t R2 − t0 K 2
=
t R1 − t 0
K1

4. Eficacia de la columna

- Número deplato teórico (N):

t 
N = 16 R 
ω 

2

ω : anchura de la base del triángulo construido por el pico.
ω1/2: anchura de la media altura del pico.
- Altura de plato teórico (H):
6. Resolución (RS)

Rs =

(t R 2 − t R1 )
2(t − t )
= R 2 R1
(ω 2 + ω1 ) / 2 (ω 2 + ω1 )

H=L/N

 t 
N = 5.54 R 
ω 
 1/ 2 

2

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