CSupresora

CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA
Sistemas cromatográficos

Sistemas a desarrollar
FM

FE

• L convencional/fase ligada
• sólida
Líquida • resina intercambiadora
• gel poroso
• soporte con ligando unido

MÉTODO
reparto
adsorción
intercambio iónico
tamizado
reacción específica

Fuerzas interactivas relacionadas con
cromatografía líquida
- Fuerzas iónicas
- Fuerzas polares
- Fuerzas dispersivas
- Enlace dehidrógeno
es un ejemplo de fuerzas polares muy fuertes

Fuerzas interactivas relacionadas con
cromatografía líquida
Fuerzas iónicas
Surgen de cargas eléctricas permanentes (netas) de las
moléculas. Se usan en cromatografía de intercambio
iónico.
Fuerzas polares (van der Waals)
Surgen de dipolos permanentes o inducidos en moléculas
sin carga neta. La proximidad de una molécula con dipolo
permanentea otra molécula polarizable produce un par de
cargas opuestas en dicha molécula (polariza) resultando
una interacción eléctrica entre cargas inducidas y
permanentes. La sílica exhibe fuertes interacciones polares
con solutos y solventes debido a su superficie altamente
polar con grupos silanol que tienen dipolos permanentes
muy fuertes.

Fuerzas interactivas relacionadas con
cromatografíalíquida

Fuerzas dispersivas (fuerzas de London)
Son las más débiles. Ocurre atracción entre
dipolos instantáneos en una molécula. Resultan de
fluctuaciones de carga (Ej. fuerzas moleculares
que ocurren entre moléculas de hidrocarburos).
Las interacciones de solutos y solventes con una
fase reversa (considerando ausencia de grupos
silanol)
son exclusivamente de naturaleza
dispersiva.

Cromatografía dereparto

Fase estacionaria LÍQUIDA

Fundamento de separación: diferente
solubilidad del analito en FM y FE

Cromatografía de partición o reparto
CL convencional

Fase ligada

El líquido (FE) está
adsorbido sobre un
soporte sólido inerte

Las cadenas carbonadas (FE)
están unidas covalentemente
al soporte sólido inerte

Fase inversa
Fase móvil polar/ Fase estacionaria no polar

Fase normal
Fasemóvil no polar/ Fase estacionaria polar

Cromatografía L-L convencional

FE (líquida)
soporte inerte

Fase unida o ligada
La mayoría de las fases ligadas se forman a partir
de partículas de sílicagel, a las que se les une
covalentemente cadenas carbonadas que actúan
como FE
Representación esquemática de partícula de silicagel
OH

OH

Si

Si

O
Si
HO

O
OH
O

O
Si
OH

grupo silanol
O
OH
Si
OH
OHEmpaques de siloxanos: las fases ligadas más
frecuentes (cepillo, oligomérica y voluminosa) son
producidas por monocloro, dicloro y triclorosilanos,
respectivamente.
unión siloxano
grupo silanol reactivo
Si OH
O
unión
siloxano

+

Si OH

CH3
ClSi R

CH3
alquil clorosilano

- HCl

Si

O

O
Si OH

C6H13
C8H17
C18H37
C4H6N
C8H9SO
etc

CH3

Si R
CH3

Fase unida tipo “cepillo” (brush)
Los grupos están enposición perpendicular a la superficie
generando una estructura de cepillo o brocha
Estructura A

Estructura B

impedimento estérico (grupos
metilos unidos al silicio)

más aceptada

Fase unida tipo “oligomérica”
Etapa 1

Alquil diclorosilano

Fase unida tipo “oligomérica”
Etapa 2

Etapa 3

Se trata la sílica
en forma
alternada con
agua y
diclorosilano. Se
va formando el
oligómero queconstituye la FE

Fase unida tipo “oligomérica”
Etapa final

CH3

Cuando se une la
última cadena, se
hace reaccionar al
grupo silanol
remanente con
trimetil clorosilano.
Es la fase ligada
más difícil de
obtener

Fase unida tipo “voluminosa” (bulk)
Consiste en una película polimérica algo abierta de FE
cubriendo la superficie de la sílica
Etapa 1

Alquil triclorosilano

Fase unida tipo “voluminosa”
Etapa2

La cadena “octildicloro”
reacciona con agua para dar
una cadena “octildihidroxo”

Fase unida tipo “voluminosa”
Etapa 3
La cadena “octildihidroxo”
reacciona con moléculas
de triclosilanos y forma la
superficie polimérica.
Los grupos clorosilanos
tienen libertad de
movimiento para
reaccionar con silanoles de
la superficie (capa de
polímero entrecruzado)

Fases ligadas
Las fases tipo...