Cuantificación de aminoacidos (método de ninhidrina)
Páginas: 3 (673 palabras)
Publicado: 25 de marzo de 2012
CUANTIFICACIÓN DE AMINOACIDOS
(MÉTODO DE NINHIDRINA)
INTRODUCCIÓN
Hace muchos años, Ruhemann demostró que los aminoácidos y la ninhidrina reaccionan con gran sensibilidad para dar uncompuesto púrpura, ahora conocido como púrpura de Ruhemann. El ensayo se basa en la reacción con ninhidrina del grupo amino de aminoácidos libres y de los grupos amino de la molécula proteínica. Esteproceso transcurre en varias etapas. En un principio, como resultado de la interacción del aminoácido con la ninhidrina se forma una base de Schiff. Luego ésta sufre un reagrupamiento, se descarboxíla yse descompone en aldehído y aminodicetohidrindeno como se observa en la siguiente figura:
El aminodicetohidrindeno se condensa con otra molécula de ninhidrina más y el compuesto formado, alenolizar, toma un color violeta azul. Esta reacción se verifica según el esquema siguiente:
En presencia de disolventes orgánicos (acetona, etanol etc.) en los cuales se prepara ladisolución de ninhidrina, la reacción transcurre del modo siguiente:
El producto de esta reacción contiene en su composición el radical R- del aminoácido inicial que provoca diferentescoloraciones (azul claro, violeta, roja y amarilla) en los compuestos que surgen en la reacción entre los aminoácidos y la ninhidrina. Aunque los aminoácidos forman el púrpura de Ruhemann bajo condicionesapropiadas (pH cercano a 5.0), los aminoácidos prolina e hidroxiprolina dan solamente un producto amarillo-café.
OBJETIVO
- Cuantificar el contenido de aminoácidos libres de una muestra problema porel método de ninhidrina.
- Analizar las características fisicoquímicas de los aminoácidos y los fundamentos químicos en los que se basa la cuantificación de aminoácidos por el método de ninhidrina.Material Reactivos
10 tubos de ensayo de 15 X 100 mm
3 pipetas de 1 ml y 3 de 5 ml
1 espectrofotómetro
1 gradilla
1 parrilla eléctrica
2 vasos de precipitados de 250 ml
1 piseta...
(MÉTODO DE NINHIDRINA)
INTRODUCCIÓN
Hace muchos años, Ruhemann demostró que los aminoácidos y la ninhidrina reaccionan con gran sensibilidad para dar uncompuesto púrpura, ahora conocido como púrpura de Ruhemann. El ensayo se basa en la reacción con ninhidrina del grupo amino de aminoácidos libres y de los grupos amino de la molécula proteínica. Esteproceso transcurre en varias etapas. En un principio, como resultado de la interacción del aminoácido con la ninhidrina se forma una base de Schiff. Luego ésta sufre un reagrupamiento, se descarboxíla yse descompone en aldehído y aminodicetohidrindeno como se observa en la siguiente figura:
El aminodicetohidrindeno se condensa con otra molécula de ninhidrina más y el compuesto formado, alenolizar, toma un color violeta azul. Esta reacción se verifica según el esquema siguiente:
En presencia de disolventes orgánicos (acetona, etanol etc.) en los cuales se prepara ladisolución de ninhidrina, la reacción transcurre del modo siguiente:
El producto de esta reacción contiene en su composición el radical R- del aminoácido inicial que provoca diferentescoloraciones (azul claro, violeta, roja y amarilla) en los compuestos que surgen en la reacción entre los aminoácidos y la ninhidrina. Aunque los aminoácidos forman el púrpura de Ruhemann bajo condicionesapropiadas (pH cercano a 5.0), los aminoácidos prolina e hidroxiprolina dan solamente un producto amarillo-café.
OBJETIVO
- Cuantificar el contenido de aminoácidos libres de una muestra problema porel método de ninhidrina.
- Analizar las características fisicoquímicas de los aminoácidos y los fundamentos químicos en los que se basa la cuantificación de aminoácidos por el método de ninhidrina.Material Reactivos
10 tubos de ensayo de 15 X 100 mm
3 pipetas de 1 ml y 3 de 5 ml
1 espectrofotómetro
1 gradilla
1 parrilla eléctrica
2 vasos de precipitados de 250 ml
1 piseta...
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