Cuantificaci n de prote nas utilizando el m todo de Bradfort

Cuantificación de
proteínas utilizando el
método de Bradfort.
Alumnos: Sebastián
Kiara Jiménez
Carla Muñoz
Matías Soto
Fecha: 04-05-2015

Tabla de curva decalibración
Tubo

0

1

2

3

4

Albumina (ul)

0

25

50

75

100

Agua d.(ul)

10
0

75

50

25

0

Reactivo de bradford
(ml)

1

1

1

1

1

Concentraciónde
proteínas

0

0.025

0,05

0,075

0,1

Cantidad
de
0 proteína
7,5*10ˉ
5*10ˉ³ 2,5*10
0,01*10ˉ
Cálculos
de concentración
de
Determinación
de laconcentración
de
proteínas
³
³
proteínas ˉ³
Tubo 2
Por método de la ecuación de la
Y=bx + a
C1
* V1 = C2 * V2
recta.
Tubo A:
0,1 mg/ml* 25սl = C2 *
0,147 =1,248x+0,031100սl
0,147-0,031/1,248=x
0,1mg/ml*20սl =C2
100սl
0,093=x
0,025 mg/ml =C2
0.093*Fd.=
concentración inicial
0,093*5=

TABLA DE CUANTIFICACION MUESTRA PROBLEMATubo

A

B

C

D

Muestra
(ul)

20

25

30

10

Agua d. (ul) 80

75

70

90

Reactivo de 1
bradford
(ml)

1

1

1

Tabla
de concentraciones
por ecuación
delarecta.
Absorbanci
0,147 0,178
0,255
0,095
astubo
A
B
C
D
Ecuación de
la recta

0,093 0,118

0,179

0,051

Concentració
n * dilución

0,046 0,471
5

0,596

0,051Cálculos.

Determinación de concentración de
proteínas(muestra problema)
Utilizando el Fc.

Ecuación de la recta

Y=1,248x+0,0
31

C= Fc*A

Promedio de lasconcentraciones= 0,0625
Fc= x + c
y

C=a
b
C= 0,025

Fc=0,0625+0,025/
0,109
Fc=0,803 Tubo

Tubo A:
C=0,803*0,147
C=0,118*Fd.
C=0,118*5
C=0,59mg/ml
A

B

C

DConcentraciones
de proteínas por
factor de
concentración

0,11
8

0,143

0,205

0,076

Factor de
concentración *
dilución

0,59

0,57

0,68

0,76