Cuantificacion de azucares reductores metodo DNS

nefrologia
DETERMINACIÒN DE AZÚCARES REDUCTORES MÉTODO DNS
Paola T. Guzmán G. 1, Gabriel F. García A. 2 Emmanuel Larios3
Fundación Universidad de América Campus de los Cerros: Avda Circunvalar No. 20-53. Tel: 57 1 3376680. Fax. 57 1 3362941.
Dirigido a: Carolina Rojas Pérez4
lcrojasp@gmail.com


Resumen: Se desarrolló un procedimiento para determinar la concentración los azucares queposeen extremos carbonilos fácilmente oxidables (azúcares reductores) por el método del ácido 3,5 dinitro salicílico (DNS); la determinación de estos azúcares se realizó con el objeto de obtener una curva de calibración, con este reactivo (DNS) que tiene capacidad de oxidar a los azúcares reductores dando resultados colorimétricos que se pueden medir con una longitud de onda de 540nm en elespectrofotómetro.
Palabras clave: Reactivo 3,5 dinitro salicílico (DNS), curva, calibración, azucares reductores, espectrofotómetro.

1. INTRODUCCIÓN

Hoy en día la industria licorera y alimenticia utiliza varios tipos de métodos analíticos para la determinación azúcar y alcohol en los licores y/o bebidas a utilizar como medio de venta. Uno de los métodos más acordes y con mejor resultados enla determinación de los azucares con carácter reductor, es el método (DNS), método que ha sufrido varias modificaciones a través de los años para adecuarse al análisis de diferentes materiales y su principal ventaja radica en su alta sensibilidad y productividad debido a que es un método espectrofotométrico; el procedimiento se basa en una reacción redox que ocurre entre el DNS y los azúcaresreductores presentes en la muestra, sin embargo a nivel industrial no es recomendable utilizarlo cuando dicha trata sustancias tales como mieles y caldos de fermentación que lo contengan, esto debido a según estudios realizados en la materia, a los altos niveles de dispersión.
El presente informe desarrollara el procedimiento respectivo para la determinación de azucares reductores a partir de unasolución patrón de glucosa de concentración 1g/L, que permitirá realizar y ajustar una curva de calibración, y una solución desconocida; por el método del ácido 3,5 dinitro salicílico (DNS).


2. DATOS

Se utilizó una solución patrón de glucosa ( l ) (1g/L)
En la Tabla 1.0 se muestra las cantidades de volumen de solución de glucosa, agua destilada y solución DNS necesarias para la realizaciónde las 5 soluciones y el blanco (que es la referencia de 0 para la toma de absorbancia en el espectrofotómetro), para proceder a la toma de datos en el espectrofotómetro.

Dilución
Blanco
1
2
3
4
5
Volumen de solución I (mL)
0

0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
Volumen de agua (mL)
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
Volumen DNS (mL)
2
2
2
2
2
2
Volumen Total (mL)
2.5
2.5
2.5
2.5
2.52.5
Tabla No.1 Datos para la preparación de soluciones

Para la construcción de la curva de calibración es necesario conocer las concentraciones de azúcar en cada solución después de haber realizado la dilución con el agua destilada. Esta concentración se puede determinar con la ecuación:

(Ec. 1)

Esta es la ecuación No. 1 (Ec. 1), despejando de esta ecuación la C2,que es la de interés se obtiene

De esta ecuación se sabe que la C1 es la concentración de la solución patrón de glucosa (1g/L), y el volumen final (V2) que es 6,5mL que es el volumen obtenido después de agregar los 4mL de agua en todas las soluciones. A partir de esta ecuación se determinan las concentraciones de la siguiente manera:

Para la solución No. 1 se obtiene



Este procesose repite hasta obtener las concentraciones de azúcar de las 5 soluciones a estudiar, los cuales están registrados en la Tabla No. 2

Dilución
Blanco
1
2
3
4
5
Concentración (g/L)
0
1/65
2/65
3/65
4/65
5/65
Tabla No. 2 Concentración de azúcar de las 5 soluciones.

Después de preparadas las soluciones, se mide la absorbancia con el espectrofotómetro y se obtiene la tabla No. 3,...