Cuantificacion De Bacterias



Centro de Bachillerato Tecnologico,Industrial y de Servicios N°85

Alumno: Tejeda Ramirez Jose Angel


Docente: Q.F.B Ornelas Mijangos Jesús Melesio


Especialidad: Técnico Laboratorista Químico

Submodulo 3:
“Cuantifica microorganismos con base en las normas”

Grado y Grupo: 4BLV N° De Equipo: “1”

Tema: “Metodos directos de cuantificación de microorganismos”Ciudad: Coatzacoalcos, Ver.
Fecha de entrega: 13/Feb/15

Medición Directa del Crecimiento Microbiano.

Recuentos en Placa:
El método utilizado con más frecuencia para la medición de poblaciones bacterianas es el recuento en placa. Una ventaja importante de esta técnica es que mide el número de células viables. Una desventaja es que se requiere bastante tiempo, por lo general 24horas o más, para que se formen colonias visibles. Esto puede plantear un grave problema en algunas aplicaciones, como por ejemplo el control de calidad de la leche, cuando no es posible mantener el lote determinado durante tanto tiempo.
El recuento en placa se basa en la suposición de que cada bacteria crece y se divide para producir una sola colonia. Esto no siempre es cierto porque las bacteriascon frecuencia crecen unidas en cadenas o con grupos. Por consiguiente, a menudo una colonia no se produce como resultado de única bacteria si no de segmentos cortos de una cadena o de un agregado bacteriano. Para reflejar esta realidad los recuentos en placa suelen informarse como UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC).
Cuando se realiza el recuento en placa es importante que crezca solo un númerolimitado de colonias en placa. Cuando hay demasiadas colonias las células se encuentran apiñadas y no pueden desarrollarse; esta situación es causa de inexactitudes en el recuento.
Diluciones Seriadas: Consideremos, por ejemplo, que una muestra de leche contiene 10000 bacterias por mililitro. Si se sembraran 1ml de esta muestra se formarían en teoría 10000 colonias sobre el medio de la CajaPetri, obviamente sería imposible contarlas en la placa. Si se transfiriera 1ml de la muestra a un tubo que tuviera 9ml de agua estéril cada mililitro resultante contendría 1000 bacterias. Si se inoculara de nuevo 1ml de este líquido en una caja Petri el número de colonias serian potenciales todavía sería excesivo para el recuento, por lo tanto podría hacerse otra disolución seriada. Se transferiría1ml del líquido que contuviera 1000 bacterias a un segundo tubo de agua esteril que contuviera 9ml, cada mililitro de este tubo ahora contendría 100 bacterias y si se sembrara 1 ml de ese contenido en una placa se formarían 100 colonias, un numero fácil de contar, ahora tendríamos disoluciones seriadas.


Placa vertida y diseminación de placa: El recuento en placa se efectúa con el método de laplaca vertida o con el método de diseminación en placa.
El método de la placa vertida, se inocula 1,0mL o 0,1mL de disoluciones de la suspensión bacteriana en una caja Petri. El medio nutritivo en el que el agar se mantiene líquido en un baño de agua a cerca de 50° C, se vierte sobre la muestra que luego se mezcla en el medio con una agitación suave de la placa. Cuando el agar se solidifica la placase incuba. Con esta técnica las colonias crecerán dentro del agar nutritivo (a partir del medio de suspensión cuando el agar nutritivo se solidifica) así como en la superficie del agar.
Esta técnica tiene algunos inconvenientes porque ciertos microorganismos relativamente sensibles al calor pueden resultar dañados debido al agar fundido y por consiguiente ser incapaces de formar colonias.
Lascolonias que aparecen debajo de la superficie no son adecuadas para estas pruebas, para evitar estas pruebas con frecuencia se utiliza el método de diseminación en placa, para ello sobre la superficie del medio previamente vertido y solidificado se coloca 0.1mL de Inoculo, el que se extiende uniformemente sobre la superficie del medio utilizando una varilla de vidrio previamente esterilizada de...