cuantificacion de clorofila
Laboratorio de Bioquímica Vegetal
“Extracción y Cuantificación de Clorofilas A y B”
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Resumen
La clorofila a y b son los pigmento involucrados directamente en la transformación de la energía lumínica en
energía química, lo cual permite laposterior fijación del CO2 atmosférico, en una serie de reacciones
bioquímicas conocida como fase oscura de la fotosíntesis. Se sabe que sólo una fracción muy pequeña de la luz
dentro del espectro visible que incide en las hojas de las plantas es finalmente transformada en energía química.
Esta práctica de laboratorio tiene fin principal la extracción y cuantificación, a partir de tejidos vegetales, declorofila A y clorofila B. Así mismo, se pretende introducir al estudiante en el manejo de espectrofotometría y
en el análisis de espectros de absorción de pigmentos.
Palabras Clave:
Clorofila; Cuantificación de Clorofila; Equipo de espectrofotometría, Absorbancia,
Centrifugación.
1. Introducción
Las clorofilas son una familia de pigmentos de color
verde, las cuales estánconformadas por cuatro
anillos de pirrol dispuestos en una estructura cíclica,
en cuyo centro se encuentra un átomo de magnesio
unido a dos átomos de nitrógeno. La estructura de
la molécula de clorofila tiene dos partes: un anillo
de porfirina y una cadena larga llamada fitol. El
anillo de porfirina es un tetrapirrol, con cuatro
anillos pentagonales de pirrol enlazados para formar
Fig 1.Estructura molecular de la clorofila
un anillo mayor que es la porfirina (Fig. 1).
El fitol es una cadena hidrocarbonada con restos de
metilo (-CH3) a lo largo.
1
Tiene, como todas las cadenas orgánicas basadas
dos picos de absorción de luz ubicados en el
sólo en C e H, un carácter “hidrófobo”; es decir, que
espectro visible, uno en la región del color azul
repele al agua. La cadenadel fitol sirve para anclar la
(400-500 nm) y otro en la zona rojo claro del
molécula de clorofila en la membrana del tilacoide.
espectro (600-700 nm). La capacidad de absorción
Estos pigmentos se encuentran presentes tanto en las
del verde (500-600 nm) por parte de las clorofilas es
cianobacterias (bacterias fotosintéticas) como en
prácticamente nula, razón por la cual lasplantas y
todos
los tejidos fotosintéticos se ven del mismo color
aquellos
organismos
que
contienen
cloroplastos en sus células. Las clorofilas son
(Fig. 3).
pigmentos vitales para realizar la fotosíntesis, ya que
tienen como función absorber la energía lumínica la
cual es captada a determinadas longitudes de onda,
que están ubicadas en el espectro visible (Fig. 2).Fig 3. Espectro de absorción de clorofilas A y B.
Fig. 2. Espectro electro magnético de la luz.
Los carotenoides, otro tipo de pigmentos vegetales
En la naturaleza se pueden hallar varios tipos de
(rojos, anaranjados o amarillos) contribuyen a la
clorofilas, las cuales varían en cuanto a su estructura
prevención de la oxidación delas clorofilas y ayudan
molecular y capacidad deabsorción de luz dentro del
a llenar los vacíos de absorción de luz, en zonas del
espectro visible de la luz. Las clorofilas se
espectro de luz donde claramente las clorofilas no
encuentran
las
absorben fuertemente. La clorofila b se diferencia
membranas de los tilacoides. Las clorofilas más
de la clorofila a solamente por estar sustituido el
abundantes en los tejidosvegetales corresponde a la
grupo metilo del carbono 3 en el segundo anillo
clorofila a (verde azulosa) y la clorofila b (verde
pirrólico, por un grupo aldehído. Esta diferencia es
amarillenta), las cuales participan directamente en la
suficiente para causar un cambio notable en la
trasformación de la energía lumínica en energía
coloración
química (ATP). Las clorofilas...
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