Cuantificacion De Proteinas

Cuantificación de Proteínas


Resume:

Para la cuantificación de proteínas se utiliza un espectrofotómetro. Esta máquina es especializada para medir la absorbancia y tramitancia. En estelaboratorio como objetivo principal teníamos medir la concentración de proteínas en albumina de huevo. Hicimos utilización de diluciones en seriadas para hacer nuestra solución madre (stock) mas diluida.Luego de esto los tubos con las diferentes concentraciones se colocaron en el espeto fotómetro para determinar las diferentes concentraciones.
Introducción:
El espectrofotómetro es un maquina quese utiliza para medir la concentración de proteínas, ya sea por tramitancia o absorbancia. El espectrofotómetro se compone de fuente de luz, selector de largo de onda, apertura, cubeta y foto celda,las siguientes son partes esenciales para hacer las mediciones. Estas mediciones la hace por nm, esto se hace a través de la luz visible, largo de onda, luz ultravioleta y luz infrarroja. Esta luzvisible pudo haber sido tanto transmitida como absorbida a diferentes largos de onda. Mientras mas luz es absorbida, menos luz es transmitida. A base de los resultados obtenidos se puede construir unagrafica de la concentración versus la absorbancia del compuesto.
Materiales:
Los materiales que se utilizaron en nuestro laboratorio fueron: agua destilada, solución madre de albumina de suerobovino, solución de albumina de suero bovino (desconocido), pipetas serológicas de 1 y 5mL, micro pipetas, papel de lente, 5 tubos de ensayo de 10mL, gradillas, reactivo de Biuret, 10 cubetas paraespectrofotómetro, papel de grafica, espectrofotómetro y un vortex.

Procedimiento:

1. Añada 1mL de la solución madre al tubo de ensayo.
2. Haga diluciones seriadas de 1/10, 1/100, 1/1000,1/10000 y transfiera 1mL del desconocido a cuatro tubos de ensayo.
3. Añada 4mL del reactivo Biuret a los tubos, mezcle con un vortex y deje en incubación por 30 minutos.
4. Determine la...