Cuantificacion de proteinas

Informe de laboratorio nº 3
Cuantificación espectrofotométrica de aminoácidos y proteínas
Bioquímica














03 de octubre 2013
Introducción
Las proteínas sonestructuras originadas a partir de sólo 20 unidades diferentes llegan a alcanzar grados de complejidad tales, que pueden reconocer a otras moléculas ,facilitar reacciones químicas ,transportar sustancias ,etc. 1.Los elementos químicos que constituyen a las proteínas se encuentran distribuidos en bloques o unidades estructurales llamadas aminoácidos ; las proteínas son fundamentalmente polímeros deaminoácidos .
El análisis espectrofotométrico es un método de análisis óptico que permite comparar la radiación absorbida y una que tiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Las proteínas muestransu máximo de absorción a 280 nm debido a la presencia de residuos de aminoácidos aromáticos, también se puede utilizar la longitud de onda de 220 nm que es propia de los enlaces peptídicos2.Objetivos
- Llevar a cabo la espectrofotometría para reconocer y cuantificar aminoácidos y proteínas por su absorbancia a 280nm y a través de esto incorporar principios sobre su uso y función.
- Describirlas concentraciones de proteínas y aminoácidos en la solución trabajada.
Procedimiento experimental
Para comenzar se tomaron 4 tubos de ensayo de 10mL los cuales fueron rotulados con diferentessoluciones las cuales eran: NaCl 0.9% p/v, glicina 0,025 mg/mL, triptófano 0,025 mg/mL y Seroalbúmina de Bovino (SAB) 1 mg/mL en NaCl 0,9% p/v. y puestos en una gradilla. Posterior a esto se agregó 3ml de cada solución a su respectivo tubo de ensayo con la ayuda de la Micropipeta p1000 más puntas, las cuales son desechadas a medida que ocupamos diferentes soluciones.
Posteriormente que lasmuestras estaban listas fueron llevadas al espectrofotómetro UV- visible, pero antes de eso las soluciones de los diferentes tubos de ensayos tuvieron que ser vaciadas dentro de cubetas de cuarzo....