Cuantificacion de proteinas

Objetivo:
Aplica los procedimientos adecuados para el manejo de animales de laboratorio, de acuerdo a las normas de ética para evitar el maltrato a los animales, y obtener los beneficiosrequeridos en la práctica. Cuantifica el contenido de proteínas totales en el suero sanguíneo de ratón, mediante el uso de un kit comercial con el propósito de conocer la cantidad de estas biomoléculas encondiciones bioquímicas y fisicoquímicas normales.
Introducción
Los métodos de proteína son todas aquellas técnicas que se emplean en el estudio de proteínas; incluye técnicas genéticas, técnicas dedetección de proteínas, técnicas de aislamiento y purificación de proteínas.
Métodos genéticos
Traducción conceptual: muchas proteínas no se secuencian directamente, sino que se conoce su secuenciapor "traducción conceptual" de su secuencia de mRNA.
Mutagenesis dirigida: permite producir variantes de proteínas para estudiar los cambios en su estructura y en su función.
Evolutivo: consiste en elanálisis de los cambios en las secuencias de diferentes especies usando un sofware como BLAST.
En el caso de proteínas implicadas en enfermedades humanas, pueden identificarse comparando los alelosde la enfermedad y de otros fenotipos.
Detección de proteínas
InmunotinciónInmunoprecipitaciónInmunoelectroforesisWestern blotEnsayo del ácido bicinconínicoEspectrometría
Ensayo enzimáticoDesarrollo:
Material:Reactivos:
MicropipetaTotal proteína
EppendorfVaso dilatador
CentrifugadoraHeparina
Jeringas de insulina
Isipós o cotonetes
Algodón
Resultados
Espectrofotometría
MuestraMedición (nanómetros)
Patrón 0.505 nanómetros
1 0.229 nanómetros
2 0.201 nanómetros
3 0.199 nanómetros
4 0.235 nanómetros
5 0.504 nanómetros
6 0.161 nanómetros
PT=AMuestraAPatrónx 7 consentración=g/dLPT=0.2290.505x7=3.17g/dLPT=0.2010.505x7=2.78g/dLPT=0.1990.505x7=2.75g/dLPT=0.2350.505x7=3.2g/dLPT=0.5040.505x7=6.98g/dLPT=0.1610.505x7=2.23g/dLDiscusión de resultados
Se pudo observar que...