Cuantificacion De Proteinas

“practica cuantificación de proteinas”
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Laboratorio de Bioquimica

Introducción
Materiales
* Espectrofotómetro
* 5 tubos de ensaye
*5 pipetas
* Propipetas
* Mechero
* Vaso de precipitados
Reactivos
* Peptona
* Gelatina
* Albumina
* Tirosina
* Agua destilada
* Ninhidrina
* Acido nítrico(HNO3)
* Hidróxido de amoniaco (NH4OH)
* Biuret

Metodología

En el experimento ninhidrina: se tomaron .5ml de peptona, gelatina, albumina, tirosina y agua destilada en tubos de ensayediferentes, después se agrego .5ml se dejo reposar por 10 minutos y se observa su cambio de coloración.
Experimento xantoproteica: se tomaron de nuevo los reactivos del experimento anterior con la mismacantidad, se agrego .5ml de acido nítrico (HNO3), se paso a ebullir por 5 minutos, luego se dejo reposar 10 minutos para poder agregar hidróxido de amoniaco (NH3OH) por estratificación agregando 3gotas.
Experimento biuret: se toman los mismos reactivos con la misma cantidad, se agrega .5ml de reactivo de biuret y se observa el cambio de coloración.
Se hace a continuación una curva decalibración sobre la albumina a diferentes miligramos junto con 2 ml de biuret en cada una junto con una muestra x.

Resultados

Prueba de ninhidrina
Peptona | amarillo ++ |
Gelatina | amarillo + |Albumina | blanco |
Tirosina | sin cambio (negativo) |
Agua | sin cambio |
Tabla.-1 se muestran los resultados después de haber agregado la ninhidrina, se pone el signo + para marcar lo fuerte delcolor.

Prueba xanproteica
Peptona | anaranjado + |
Gelatina | Anaranjado+ |
Albumina | anaranjado +++ |
Tirosina | anaranjado ++ |
Agua | no presento |

Tabla.-2 se muestran losresultados de la prueba xantoproteica, marcando con + el color fuerte de la reacción.
Prueba biuret

Peptona | morado + |
Gelatina | morado ++ |
Albumina | morado +++ |
Tirosina | verde |...