Cuantificacion de vitamina C

PRACTICA 4: CUANTIFICACIÓN DE VITAMINA C
Al hablar de cuantificación nos referimos a la determinación de la abundancia absoluta o relativa, en este primer caso encontramos una estimación de laabundancia del acido ascórbico en cada una de nuestras tres soluciones que contenían .2ml de sangre, jugo de naranja y vitamina c, combinadas con .8ml de TCA (Acido tricloroacético) al 10%respectivamente, como se muestra en la figura 1.
Figura 1
Para estimar la abundancia del acido ascórbico en cada sustancia empleamos .2ml de agua destilada y .2ml de Folín-Ciocalteau previamente diluidas yagregamos el sobrenadante de dichas sustancias (figura 2) (ver resultados). Leímos absorbancia a 760nm de la muestra de sangre (ver anexo 1)
Figura 2
En el segundo caso preparamos 2 muestras de .6ml y.8ml de acido ascórbico 50mg/ml y aforamos a 50ml (figura 3). Calculamos su absorbancia para realizar la curva de calibración (ver anexo 2).
Figura 3
Introducción
El ácido ascórbico es un ácido deazúcar con propiedades antioxidantes. Su aspecto es de polvo o cristales de color blanco-amarillento, es soluble en agua.
Este acido interacciona con el Folín-Ciocalteau produciendo calor con unaabsorbancia a 760nm, esto se explica con la Ley de Beer-Lambert quien confirma que por medio de un calculo matemático se expresa cómo la materia absorbe la luz.
Dentro de un fotómetro de optica, seutiliza un haz de luz enfocado de manera precisa para penetrar el elemento del procesado. Esta ley afirma que la cantidad de luz que sale de una muestra es disminuida por tres fenómenos físicos:
1. Lacantidad de material de absorción en su trayectoria (concentración)
2. La distancia que la luz debe atravesar a través de la muestra (distancia de la trayectoria óptica)
3. La probabilidad de que elfotón de esa amplitud particular de onda sea absorbido por el material (absorbencia o coeficiente de extinción)
En la actualidad es más sencillo hacer el calculo que nos dice la ley de Beer gracias...