Cuantificación de Carbohidratos, BIOQUIMICA







INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA

CQU-310



CUANTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Integrantes
Valeska López
María Elena Peters
María José Quintanilla
Gloria Vargas

Profesores
Enrique Mejías
Francisco Vargas

Fecha: 05/11/2013
INTRODUCCIÓN

Los carbohidratos, también conocidos como glúcidos, hidratos de carbono y sacáridos son aquellas moléculas orgánicascompuestas por carbono, hidrógeno y oxígeno que resultan ser la forma biológica primaria de almacenamiento y consumo de energía.
De acuerdo a la cantidad de moléculas que intervienen en su formación nos encontramos con diferentes tipos de carbohidratos, los monosacáridos (una sola molécula), los disacáridos (dos moléculas), los oligosacáridos (de tres a nueve moléculas) y los polisacáridos(cadenas ramificadas de más diez moléculas).Si bien desempeñan una multiplicidad de funciones, la reserva de energía y la formación de estructuras son las dos mas importantes. Asimismo los carbohidratos están ampliamente distribuidos en vegetales y animales, tienen importantes funciones estructurales y metabólicas
La Glucosa es el carbohidrato más importante. En los vegetales se sintetiza apartir de dióxido de carbono y agua por medio de la fotosíntesis. Los animales pueden sintetizar carbohidratos a partir de aminoácidos, pero todos se derivan finalmente de vegetales.
La glucosa es un monosacárido con fórmula molecular C6H12O6 Clasificado como Aldohexosa, es una hexosa, es decir, contiene 6 átomos de carbono, y es una aldosa, esto es, el grupo carbonilo está en el extremo de lamolécula (es un grupo aldehído). Es una forma de azúcar que se encuentra libre en las frutas y en la miel, es el principal combustible metabólico de mamíferos (excepto de los rumiantes), y un combustible universal del feto, precursor para la síntesis de todos los otros carbohidratos en el cuerpo, y es el componente principal de polímeros de importancia estructural como la celulosa y de polímerosde almacenamiento energético como el almidón y glicógeno.
Existen diferentes métodos para determinar la concentración de carbohidratos en muestras desconocidas, entre los que cuentan los Métodos Químicos y Métodos Enzimáticos, entre los métodos químicos están los basados en reacciones que dan origen a compuestos coloreados, tales como las que se dan después de tratar los monosacáridos conácido mineral fuerte y hacer reaccionar el furfural o hidroxifurfural formado, con compuestos orgánicos tales como fenoles, aminas aromáticas, urea y antrona. Pero los métodos químicos carecen de especificidad, no así los métodos enzimáticos que son específicos, reproducibles, rápidos, ideal para propósitos analíticos, por lo cual tienen aplicación en clínica. Con respecto a los métodosenzimáticos, estos incluyen los análisis de monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. En el caso de los dos últimos, el análisis incluye la hidrólisis enzimática de los enlaces glicosídicos.
El método de glucosa oxidasa,es un método enzimático que se basa en la especificidad de la enzima Glucosa Oxidasa (GOD) por la D-Glucosa, dicha enzima cataliza la oxidación de D-Glucosa a ácido D-Glucónico yPeróxido de Hidrógeno (H2O2), en presencia de oxígeno y agua, en una segunda reacción el peróxido de hidrógeno con o-dianisidina en presencia de peroxidasa forma un producto coloreado (o-dianisidina oxidada). O-dianisidina oxidada con ácido sulfúrico se transforma en un producto coloreado mucho más estable. La glucosa oxidasa es ampliamente utilizada para la determinación y cuantificación deglucosa libre en los fluidos biológicos, tales como sangre y orina, en materia prima vegetal y en la industria de los alimentos.




OBJETIVOS

Conocer el método enzimático Glucosa Oxidasa.
Conocer el funcionamiento del Kit GAGO-20 SIGMA
Determinar las absorbancias de las muestras en el espectrofotómetro.
Determinar la concentración de glucosa en las muestras problema....