Cuantificación De Proteinas

INTRODUCCION Y OBJETIVOS:
Las proteínas son macromoléculas, constituidas por aminoácidos dispuestos en una cadena lineal y unida por vínculos péptidos, son esenciales para el correctofuncionamiento de nuestro organismo, y además, regulan numerosas funciones vitales. Muchas proteínas son enzimas que catalizan reacciones bioquímicas y son vitales para el metabolismo. La estructura final de unaproteína dependerá de las condiciones de pH, fuerza iónica, temperatura, también del entorno que rodea a la molécula, como así también la presencia de otras moléculas que pueden ser determinantes parael equilibrio. Para el estudio de una proteína, de la actividad de una enzima o el contenido proteico de un alimento, es necesario conocer cuantitativamente la concentración de proteínas, que se basaen una técnica de rutina básica, donde se aborda un esquema de purificación de una proteína concreta, se realiza cuando se requiere conocer la actividad específica de una preparación enzimática, parael diagnóstico de enfermedades. Se han desarrollado diferentes métodos o técnicas para la cuantificación, entre los métodos más comunes están, Biuret y Lowry. El método de Biuret Se basa en laformación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. 1Cu2+ se acompleja con 4 NH. La intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidadde proteínas y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. Se mide la absorbancia a 540 nm y se compara con las medidas de soluciones de proteínas de concentraciónpatrón. La sensibilidad del método es de 0,25-200 mg de proteínas por mL de solución y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados. El método de Lowry es unmétodo colorimétrico de valoración. En el cual se añade a la muestra un reactivo que forma un complejo coloreado con las proteínas, siendo la intensidad de color proporcional a la concentración de...