Cuantificar

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Dra. Keiko Shirai Práctica No.6 "Curva de crecimiento de Escherichia coli: cuantificación de microorganismos” INTRODUCCIÓN Los métodos directos de cuantificaciónde microorganismos permiten establecer la población total de microorganismos existentes, tienen la ventaja de ser rápidos aunque no es posible diferenciar a las células vivas de las muertas. Entreestos métodos tenemos la turbidimetría y el conteo de células. Turbidimetría En una suspensión microbiana la cantidad de microorganismos esta directamente relacionada con la turbiedad o densidad óptica.La metodología es útil con suspensiones de densidad microbiana baja y con cultivos en donde los microorganismos son unicelulares y con un tamaño de unos cuantos micrómetros, características que lespermiten mantenerse suspendidos y homogéneamente distribuidos; en tanto que con microorganismos de mayor tamaño y con aquellos productores de polisacáridos esta metodología no es adecuada. Recuentomicroscópico Un volumen conocido de muestra es depositado en un portaobjetos especial para cuenta (hemacitómetros, cámaras de Petroff-Hauser, Neubauer o de Helber; estas consisten de portaobjetosexcavados y cuadriculados que facilitan el recuento por unidad de superficie y de volumen. Con la cuantificación de microorganismos a través del tiempo es posible el representar gráficamente el crecimientomicrobiano. La curva presenta distintas fases: • • • • Fase de latencia ó lag: período de adaptación de un microorganismo a un nuevo medio de cultivo. Fase exponencial o logarítmica: aumento regular dela población que se duplica a intervalos regulares de tiempo (td). Fase estacionaria: cese del crecimiento por agotamiento de nutrientes, por acumulación de productos tóxicos, etc. Fase de declinacióno muerte: el número de células que mueren es mayor que el número de células que se dividen.

Las propiedades de un microorganismo dependerán de la fase de la curva en que se encuentren (por...