Cuenta De Microorganismos

AISLAMIENTO Y RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS


• INTRODUCCION. • Los microorganismos generalmente se encuentran en la naturaleza como poblaciones mixtas lo cual para poder caracterizar e identificar un tipo particular de microorganismo, este se tiene que : • Aislar: El aislamiento se puede lograr directamente a partir de una muestra cuando el o los microorganismos están en una proporciónadecuada.

Los microorganismos varían en sus necesidades o tolerancia de oxígeno • Los aerobios son capaces de crecer con tensión de oxigeno total (en el aire el oxigeno es el 21%) y muchos pueden soportar uno de ellos son los microaerófilos que pueden utilizar este gas sólo cuando su tensión es más baja que la del aire. • Usualmente es necesario suministrar mucho aire. Esto es así por que eloxígeno es poco soluble en agua y el que es utilizado durante el crecimiento microbiano, no es reemplazado suficientemente rápido a partir de simple difusión del aire. Es deseable aireación forzosa por agitación vigorosa ya que crecen mucho mejor estos microorganismos

• DESPUES DE AISLAR A SU VEZ NOS AYUDA A USAR LAS SIGUIENTES TECNICAS. • TÉCNICA CUALITATIVA. LAS COLONIAS AISLADAS PRESENTANCARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DIFERENTES DEBIDO A QUE CADA GRUPO FILOGENÉTICO DE MICROORGANISMOS TIENE CARACTERÍSTICAS PECULIARES QUE SE VEN INFLUENCIADAS POR LAS CONDICIONES DEL MEDIO DE CULTIVO • TÉCNICA CUNTITATIVA • LA ESTIMACIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS CULTIVABLESPRESENTES EN UNA MUESTRA SEPUEDE CALCULAR MEDIANTE LA SIGUIENTE ECUACIÓN:
UFC/g Ó mL= No. DE COLONIAS X FACTOR DE X RECÍPROCO DE LADILUCIÓN ALÍCUOTA

Objetivo de la practica
• Nos sirve para poder caracterizar e identificar un tipo particular de microorganismo, este debe ser aislado y conservado como un cultivo puro. • Conocer métodos de aislamiento

Tratamiento de la muestra.
• Para el aislamiento de microorganismo se cuenta con varios métodos, los más usados son el método de estría cruzada y el de las dilucionesFundamento
• Para estudiar a los microorganismos de una muestra es importante considerar la naturaleza de ésta si es líquida se tendría que homogeneizar para distribuir a los microorganismos en la muestra y al tomar una alícuota ésta sea representativa de la misma. Si la muestra es sólida se deberá tratar de tal manera que se separen sus componentes en un diluente para que se suspendan losmicroorganismos en el líquido.

El método de las diluciones consiste en hacer una serie de diluciones, generalmente decimales, de las cuales se toman alícuotas que se siembran en medios de cultivo sólidos ya sea depositando la alícuota en la superficie y dispersándola uniformemente con una varilla de vidrio

Aislamiento por dilución en medio sólido
• Técnica de dispersión en superficie: • 1) Secolocan 0.1 mL de la dilución de la muestra con pipeta estéril en el centro de la placa y se distribuye con un varilla de vidrio acodada estéril

AISLAMIENTO EN PLACA POR ESTRÍA CRUZADA
• Consiste en depositar en una área de la placa de medio de cultivo sólido una asada de la muestra o cultivo mixto que sirve de inóculo, se extiende con el asa haciendo varios trazos en forma de secante cadavez mayor de la orilla hacia el centro, pero solamente a una distancia de 1 a 2 cm. de la orilla. • Se esteriliza el asa se deja enfriar en el medio en un lugar que no interfiera con las siguientes estrías. Se gira la caja de Petri un quinto de vuelta y con el asa esterilizada se hace una nueva serie de estrías deben extender una pequeña porción de la serie en forma similar con trazos que vayan enla orilla hacia el centro. La operación se repite 2 veces más y en la quinta se hace estrías abiertas que termine en o cerca del centro otro, cuidando que no se toquen las estrías anteriores.

RESULTADOS
PROMEDIO DE 10 6 ES DE 260 COLONIAS
10 7 ES DE 129.5 COLONIAS 10 8 ES DE 119 COLONIAS
UFC/g Ó mL= No. DE COLONIAS X FACTOR DE X RECÍPROCO DE LA DILUCIÓN ALÍCUOTA

DILUCIÓN
10-6 10-7...