cuenta total estandar

Cuestionario

1 ¿Por qué se cuentan entre 30 y 300 colonias en el método de cuenta total estándar y que otro método de cuantificación en placa de microorganismos existe?
Con el objetivo de disminuir el error de la medida.
Filtración por membrana: En este método el recuento se realiza por filtración de un volumen de la muestra a través de un filtro de membrana de tamaño adecuado para retenera las bacterias (0.22-0.45 µm). Una vez filtrada la muestra, el filtro se coloca sobre un medio de cultivo sólido y se incuba. El recuento del número de colonias formadas sobre el filtro determina el número total de bacterias en la muestra filtrada. Es un método útil cuando el número de bacterias presentes en la muestra es muy bajo. Se utiliza con frecuencia para determinar el número de bacteriasen agua.
Sembrado por vertido en placa: Consiste en añadir medio de cultivo fundido y enfriado a 50ºC sobre placa de Petri que contiene una cantidad determinada de la muestra diluida. Se tapa la placa y se rota para mezclar la muestra en el agar. Cuando el agar solidifica se incuban las placas. Las colonias se desarrollan tanto dentro del agar como en la superficie. Es un método generalmenteutilizado para el recuento de microorganismos anaerobios facultativos o microaerofilos.
Asa calibrada: La utilización de agujas o asas calibradas permite tomar volúmenes pequeños, que son inoculados en la superficie del agar mediante la técnica de siembra masiva. Las colonias son contadas y se multiplican por el factor de dilución del asa empleada. El uso más frecuente de esté método es en elurocultivo. Se determinan las UFC/g o mL de muestra
Diluciones seriadas: Se hacen diluciones de la muestra (solución madre) y se depositan gotitas de 10 ml en una placa Petri (gotitas de cultivo + agar). Se examina el crecimiento de las colonias en las gotitas tras la incubación.
Recuento directo de bacterias al microscopio: Es una técnica para determinar el número total de organismos de una muestra:Se utilizan cámaras de recuento (cámara de Petroff-Hauser) y visualización al microscopio. Es un método rápido del número total de células de una muestra pero no distingue entre viables o no viables.
2. Explique si las colonias observadas provienen de grupos de bacterias o de una sola célula ¿Qué significa el término de Unidad Formadora de Colonia (UFC)?
Término que debe utilizarse para reportarla cuenta de colonias en placa, las cuales pueden surgir de una célula o de un cúmulo de células. Es la cantidad de células separables sobre la superficie o dentro de un medio de agar semisólido que da lugar al desarrollo de una colonia visible del orden de decenas de millones de células descendientes.
3. ¿Por qué las pipetas deben de cambiarse entre cada dilución?
Debe cambiar la pipeta entrecada dilución para evitar arrastrar residuos de las diluciones anteriores que contienen más células.
4. ¿Cuáles son las características generales de los coliformes y cuál es su importancia como indicadores sanitarios?
Los coliformes se clasifican en Totales y Fecales. Los coliformes totales como características comunes destacan que:
• Poseen morfología bacilar
• Pueden ser aerobias oanaerobias facultativas
• No forman endosporas
• Gram Negativas
• Fermentan la lactosa produciendo ácido y gas en 24-38 hrs. A 36 °C
• Los coliformes Fecales comparten las mismas características que los totales pero además:
• Crecen con lactosa y la fermentan a 44.5°C ± 2°C produciendo ácido y gas en las primeras 48 hrs. De incubación.
• Son coliformes termotolerantes .
Incluye cepas de losgéneros Klebsiella y Escherichia siendo esta última el más útil indicador de calidad de alimentos.
El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para:
• La detección de prácticas sanitarias deficientes en el manejo y en la fabricación de los alimentos.
• La evaluación de la calidad microbiológica de un producto, aunque su presencia no necesariamente implica un riesgo...