Cuenta Viable´Placa

Introducción
Existen diferentes técnicas para determinar el número de microorganismos
en suelos o aguas, tanto directas como indirectas, Para la determinación
de microorganismos heterótrofostotales e hidrocarbonoclastas
aerobios, se seleccionó la cuenta microbiana por dilución en placa. Es
una técnica indirecta de cuantificación; sin embargo, provee una medición
de la viabilidadmicrobiana, permite determinar indirectamente el
potencial de biodegradación en un suelo contaminado, es la más adecuada
para medios con hidrocarburos como substrato, es rápida de
efectuar y no requiere demucho material (Lorch et al., 1995; Bossert y
Kosson, 1997).

Método
El conteo de poblaciones microbianas por dilución en placa es un
método simple y rápido para la cuenta viable de célulasmicrobianas
en el suelo. Sin embargo, la cuenta obtenida es generalmente 10 a 100
veces menos que aquella determinada por cuenta directa por microscopia.
Las razones para esta discrepancia incluyen laexclusión de la
cuenta no viable directamente en el suelo y la inhabilidad para proveer
apropiados nutrimentos en el medio de crecimiento, para obtener la
cuenta total en placa.

Fundamento
Elmétodo de dilución en placa se fundamenta en que cualquier célula
viable inoculada en un medio de cultivo se multiplica y produce
datos de fácil identificación, como la formación de colonias en placasde agar. Este método consiste en la preparación de una serie de diluciones
de una muestra de suelo en un diluyente apropiado, esparciendo
una alícuota de una dilución sobre la superficie de un mediode
cultivo sólido e incubando la placa de agar bajo condiciones ambientales
apropiadas. La dilución debe permitir generar colonias separadas,
cada colonia puede proceder de una sola célula o deuna agrupación
(unidad viable), la cual se contará como una bacteria. Bajo este fundamento,
estas placas pueden ser usadas no sólo para el conteo de
poblaciones microbianas, sino también para el...