Cuestionario vectores de clonacion

Lectura del articulo “Vectors Used in Gene Manipulation- A Retrospective”
Contestar los siguientes conceptos y/o preguntas (respuestas provenientes de la lectura del review, solo podrán incluir la imagen solicitada de otra fuente)


1. Definición de vector
Un vector es una molécula de ADN que es capaz de replicarse en un organismo huésped, y puede actuar como una molécula portadora para latransferencia de genes en el huésped.
2. Características de un vector
Características de vector
Capacidad de auto replicarse.
Origen de replicación.
Uno y a menudo múltiple, sitio de restricción de reconocimiento de enzima.
Características seleccionables de manera que las células transformadas pueden ser reconocidos desde
Las células no transformadas.
Promotor junto con el control reglamentario.Menos de 10 Kb de tamaño
3. Definición de un vector de clonación
La clonación de vector - una molécula de ADN que lleva
ADN extraño en una célula huésped, se replica dentro de una célula bacteriana y (o levadura) produce muchos copias de sí mismo y el ADN extraño.
4. Aplicaciones de los vectores de clonación?
Estos vectores se utilizan para la creación de bibliotecas genómicas o para la preparaciónde las ondas o en experimentos de ingeniería genética u otros estudios básicos.
5. Tabla de los tipos vectores más utilizados en biología molecular (incluir sus características)


















Vector
Importancia del vector
Kb
Características
plásmido

Manipulación de ADN general
10-20
Los plásmidos son replicón que se hereda de forma estable en un estado extracromosómico.
Existir como doblemolécula de ADN circular de cadena.
Poseer origen de replicación.
Marcador de selección que les permiten ser detectado.
Debe tener al menos un sitio de restricción único, para permitir ADN a insertarse en ella.
גּ (inserción)

Construcción de bibliotecas de ADNc
~10
Con un vector de inserción, un gran segmento de
la región no esencial ha sido eliminado, y dos brazos ligaron juntos. Fago Inserciónvector tiene sitio de restricción único que se utiliza
para la inserción de ADN extraño
גּ (Reemplazo)

Construcción de bibliotecas genómicas
~23
Un vector de reemplazo tiene dos sitios de restricción
que flanquean una región conocida como embutidora
fragmento. A menudo, el fragmento reemplazable
lleva sitios de restricción adicionales que pueden ser
usados para cortarlo en trozos pequeños, por lo quesu
inserción propia durante un experimento de clonación es
muy poco probable.
cósmido

Construcción de bibliotecas genómicas
~44
Estos extremos son esenciales para
empaquetar el ADN en cabezas de fago. Los
última parte de su nombre "mediados" indica que
cósmido llevar un origen de replicación del plásmido
BR322 como el que se encuentra en el plásmido P (Zubey
et al., 1995). Como plásmidos, cósmidoscontienen una
origen de replicación y un marcador seleccionable.
También poseen una enzima de restricción único
sitio de reconocimiento en la que fragmentos de ADN
puede ser ligado.
fagemido

Manipulación de ADN general
In Vitro mutagénesis
10-20
Los fagémidos son plásmidos que contienen fago f1
origen de replicación para la producción de
ADN de cadena sencilla. Por lo general son
plásmidospequeños para que tengan la capacidad de
aceptar insertos de ADN más grandes que basado M13
vectores.
M13

La secuenciación de ADN
In Vitro mutagénesis
8-9
M13 es un fago filamentoso. su DNA
molécula es mucho más pequeño que el genoma.
Es 6407 nucleótidos de longitud, circular y
consiste enteramente de ADN monocatenario. los
genoma es menos de 10 kb de tamaño, bien dentro de
el intervalo para un vectorpotencial.
BAC

Construcción de bibliotecas genómicas
130-150
Ellos son capaces de llevar
aproximadamente 200 kpb de ADN insertado
secuencia. El origen factor F de la replicación
(ORIS) mantiene su nivel en aproximadamente
una copia por célula.
YAC

Construcción de bibliotecas genómicas
1000-2000
permitir la clonación, dentro de las células de levadura, de
fragmentos de ADN genómico extranjera...