Cultio y aislamiento de bacterias

CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS

POR:

DOCENTE

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
BIOINGENIERIA
GRUPO 1
MEDELLIN-ANTIOQUIA
2010

CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS

INTRODUCCION:
En la naturaleza, las bacterias están distribuidas haciendo parte de diferentes ecosistemas. El crecimiento de estos microorganismos no se puede estudiar de manera individual debido a su tamaño, por lo cual esnecesario recurrir a medios nutritivos artificiales, donde se pueden desarrollar rápidamente y producir grandes poblaciones.

Muchas especies bacterianas son tan parecidas morfológicamente que es imposible diferenciarlas solo con el uso del microscopio, en este caso, para identificar cada tipo de bacteria, se estudian sus características bioquímicas sembrándolas en medios de cultivo especiales;así, algunos medios contienen un producto que inhibe el crecimiento de la mayoría de las especies.

Para preparar los medios de cultivo adecuados no solo hay que tener en cuenta los nutrientes sino también las condiciones físicas que permitan el crecimiento de los microorganismos:

1. Aporte de nutrientes: La cantidad y naturaleza de los nutrientes viene determinada por el rendimiento de unproducto en especial, además de los requerimientos nutricionales del microorganismo.

2. pH: Un microorganismo puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado de las sustancias producidas por el propio microorganismo, por ejemplo:

Utilización de carbohidratos  Producción de ácidos orgánicos  Acidificación
Catabolismo de proteínas  Producción de materiales nitrogenados Alcalinización

Estos cambios pueden llega a ser tan grandes que inhiban el crecimiento del microorganismo. Estos cambios se pueden prevenir controlando el pH mediante sistemas tampón. Uno de los más utilizados es la combinación de KH2PO4 y K2HPO4 tamponando el medio a un pH de aproximadamente 6.8.

3. Necesidades de gases: Los gases principales que afectan al desarrollo microbiano son el oxígenoy el dióxido de carbono. Las bacterias presentan una respuesta amplia y variable al oxígeno libre clasificándose en cuatro grupos:
i. Aerobias: bacterias que se desarrollan en presencia de oxígeno libre.
ii. Anaerobias: bacterias que se desarrollan en ausencia de oxígeno libre.
iii. Anaerobias facultativas: bacterias que se desarrollan tanto en presencia como en ausencia de oxígeno libre.
iv.Microaerófilas: bacterias que crecen en presencia de pequeñas cantidades de oxígeno libre.

4. Suministro de luz: Los organismos fotosintéticos deberán ser expuestos a una fuente de iluminación ya que la luz es su fuente de energía. Esta fuente de iluminación no debe plantear problemas de variación de temperatura, por lo que suelen usarse lámparas fluorescentes con un desprendimiento mínimo decalor.

5. Control de temperatura: El desarrollo de las bacterias depende de reacciones químicas, y la velocidad con que se efectúan estas reacciones está influida por la temperatura, por lo que la temperatura puede en parte determinar la velocidad de crecimiento de los microorganismos. Cada especie microbiana posee una temperatura óptima de crecimiento clasificándose según esto en lossiguientes grupos:
i. Psicrófilas: capaces de desarrollarse a 0° C o menos. Su temperatura óptima es alrededor de los 15° C.
ii. Mesófilas: crecen mejor entre 25 y 40° C.
iii. Termófilas: crecen mejor entre 45 y 60° C.

En el aislamiento de bacterias se utilizan varias técnicas, una de las cuales es siembra por estrías en superficie.
El principio básico de estos métodosconsiste en agotar la muestra sobre la superficie del medio para obtener colonias separadas y poder observar sus características.

MATERIALES

-Cepas Gram positivas
Bacillus subtillis
Staphylococcus aureus
-Cepas Gram negativas
Scherichia coli
-Medios de cultivo
Agar nutritivo
Caldo nutritivo
Agar EMB
Agar sangre
Agar Manitol sal
Mechero
Asas y agujas de inoculación


METODOS...