Cultivo de bacterias

PRACTICA #3 MEDIOS DE CULTIVO DE BACTERIAS Y TECNICAS DE AISLAMIENTO.
OBJETIVO DE LA PRACTICA. Que los alumnos conozcan algunos medios de cultivo comunes para bacterias y adquieran el criterio para seleccionarlos según sus necesidades. Que desarrollen las técnicas de siembra comunes de aislamiento de bacterias. INTRODUCCION. El crecimiento de los microorganismos no se puede estudiarindividualmente debido a su tamaño tan pequeño, por lo que es necesario recurrir a medios nutritivos artificiales, donde se puedan desarrollar rápidamente y producir grandes poblaciones. En estas condiciones se pueden manipular y efectuar las investigaciones deseadas. Los materiales nutritivos donde se desarrollan y multiplican los microorganismos contienen los nutrientes necesarios para su crecimiento, y sedenominan medios de cultivo, cuyos componentes son muy variados. La elección del medio se basa en el propósito del estudio. Los medios de cultivo pueden ser sintéticos, es decir de composición química conocida, o pueden ser complejos, en los cuales por lo menos hay un componente de composición desconocida. En general, los medios son ricos en proteínas no específicas, con el fin de estimular elcrecimiento de los microorganismos que se desean aislar. La mayor parte de los microorganismos requieren un medio enriquecido o suplementado por susbstancias como sangre, suero, vitaminas, etc. Los medios líquidos se pueden transformar en sólidos, mediante la adición de agar. Esto significa que conservan la misma fórmula nutritiva. Los medios de cultivo además de nutrientes y agua pueden contenersustancias inhibidoras de ciertos grupos microbianos, sin interferir con otros, conviertiéndose en medios selectivos. Cuando la muestra procede de una parte del cuerpo que contiene microorganismos de la flora normal, el desarrollo de éstos es inconveniente y puede inhibir a los microorganismos patógenos, por lo que el especimen debe sembrarse en un medio que los inhiba y permita el desarrollo delpatógeno. Estos medios son complejos y altamente selectivos para ciertos organismos. Por ej: el de Shigella-Salmonella agar (SS), el citrato-desoxicolatoagar y el sulfito de bismuto-agar, inhiben el crecimiento de la mayoría de los coliformes y permite el desarrollo de patógenos entéricos. El agar-sangre-alcohol feniletil, es selectivo para el aislamiento de cocos grampositivos positivos a partir deespecímenes contaminados con organismos gramnegativos, los cuales crecen en colonias muy pequeñitas. Los medios con telurito de potasio y con suero o sangre favorecen el aislamiento de Corynebacterium, mientras que inhiben todos

los cocos grampositivos comunes en las muestras. En sal-manitol-agar las colonias de estafilococos patógenos crecen con un halo amarillo. La adición de algunassustancias indicadoras al medio, los convierte en medios diferenciales, debido a que permiten el desarrollo de las bacterias con una apariencia colonial distintiva, según la especie. En virtud de la composición química de estos medios, se pueden caracterizar ciertos géneros bacterianos por la apariencia colonial distintiva en el medio, por ej: el medio agar-eosina-azul de metileno (EMB) y elagar-MacConkey contienen lactosa y un colorante o un indicador de pH. Las colonias fermentadoras de lactosa y productoras de aldehído, producen colonias de un color especial. Los medios para identificación de las bacterias, contienen sustratos específicos de prueba, para diferenciar unas especies de otras, en base a su capacidad enzimática. Cada especie se presenta un equipo enzimático característico de suespecie. Los medios con antibióticos: son inhibitorios para unos organismos, permitiendo aislar a otros, a partir de una población mixta. Por ej: agar-Sabouraud con cicloheximida y cloranfenicol, permite el crecimiento de hongos dermatofitos y de la mayoría de hongos patógenos, e inhibe a los hongos saprófitos y a las bacterias. Los medios de mantenimiento contienen los requerimientos necesarios...