Cultivo de tejidos

Cultivo de tejidos. Puede definirse como el conjunto de técnicas que permiten el cultivo en condiciones asépticas de órganos, tejidos, células y protoplastos. Constituye dentro de las biotecnologías, la que mayor aporte práctico ha brindado. Sus aplicaciones van desde estudios teóricos sobre fisiología y bioquímica vegetal, hasta la obtención de plantas libres de patógenos, conservacióndegermoplasma, produccción de metabolitos secuandarios, propagación masiva de plantas, mejoramiento genético, inducción de mutaciones, selección in vitro y desarrollo de protocolos de regeneración de plantas para su utilización en ingeniería genética.
Los orígenes del cultivo de tejidos se remontan al año 1902, cuando Haberlandt intentó cultivar células aisladas de plantas, postulando así el principio dela totipotencia vegetal, que es la base teórica sobre la que se sustentan todas las técnicas de cultivo in vitro.
Ventajas

1. El cultivo de tejidos in vitro y la producción de callos ha facilitado, entre muchos aspectos, los siguientes:
2. Desarrollo de los trabajos de organogénesis o sea la producción de brotes y raíces.
3. Desarrollo de la embriogénesis somática.
4. Cultivo de anteras yobtención de plantas haploides.
5. Estudios de resistencia a diferentes stress.
6. Aislamiento de células y protoplastos para su uso en posteriores trabajos de mejoramiento.
7. Introducción de nueva variabilidad genética.
8. Conservación del germoplasma.
Organogénesis
La organogénesis es un evento morfogenético que consiste en la formación de un primordio unipolar a partir de una yema, conel subsecuente desarrollo de un brote vegetativo. Existiendo siempre una conexión entre los nuevos brotes y el tejido paterno.
Un ejemplo importante que ha servido de pauta para muchas investigaciones son los trabajos desarrollados para obtener la organogénesis o sea la producción de brotes y raíces, utilizando el tabaco como modelo biológico y que alcanza su trabajo más completo con losresultados de Murashige y Skoog ( 1962). Ellos evaluaron diferentes combinaciones de auxinas,citoquininas y giberelinas y determinaron las relaciones necesarias entre las concentraciones de ellas, para poder lograr el mantenimiento de los callos sin diferenciar, la diferenciación de brotes o la diferenciación de raíces. Para ello tomaron el tejido de la médula del tallo del tabaco, formado por unparénquima de relleno, poco diferenciado debido a que este tejido no presenta citoquininas naturales. Hoy en la actualidad este bioensayo de la médula de tabaco se utiliza para evaluar la presencia de citoquininas naturales en extractos naturales de plantas.( Roca,W.1993).

Cultivo de Embrioides
Steward en 1958 obtuvo plantas de zanahoria normales, cuando transfirió agregados celulares de un mediolíquido a un medio sólido. Esto demostró la formación de embrioides a partir de células somáticas..
Pero se debe a Vasil y Hildebrandt (1965) la demostración más precisa de que a partir de una célula somática aislada se puede diferenciar una planta completa, utilizando callo obtenido del parénquima de la médula del tallo de tabaco.

Cultivo de Anteras (Androgénesis)
La androgénesis es la capacidad dedesarrollo de una planta a partir de un grano de polen (microspora). Esto puede ocurrir por un mecanismo directo (midrospora-embrioide) o indirecto (microspora-callo-embrioide).(Zenk,M.N.1974) En todos los casos se obtienen plantas haploides, aunque en el caso indirecto también se puede obtener plantas diploides. Nitsch y Nitsch en 1965 obtuvieron buenos resultados en tabaco.
Espino(Espino,E.1974) demostró la aplicabilidad del método haploide–diploide para acelerar el resultado de los trabajos encaminados a la obtención de nuevas variedades ya que con esta técnica se pueden obtener en un plazo relativamente corto líneas isogénicas con buenas características productivas y resistentes a las principales enfermedades que afectan este cultivo.Las plantas haploides son consideradas de...