Cultivo de Thraustochytridos








Laboratorio N° 3


Preparación de Cultivo Axénico de THR











Resumen
Junto con los aceites de pescado el cultivo de microalgas son las principales fuentes comerciales de los ácidos grasos poliinsaturados sin embargo la disminución de la población acuícola y el alto costo para cultivar microalgas ha llevado a buscar alternativas más económicas.Biotecnológicamente se ha estudiado un tipo de hongo marino Thraustochytrido del cual se sabe que algunas cepas producen alta cantidad de biomasa y sustancialmente lípidos ricos en PUFAs omega-3 del tipo DHA el cual es esencial para la nutrición de todo salmónido.
En el laboratorio se extrajo de un cultivo liquido previamente realizado pequeñas muestras de Thraustochytridos las que fueron observadas enmicroscopio seleccionando solo un tipo de este, se introdujo el THRs en un nuevo medio liquido con agua de mar filtrada, penicilina-estreptomicina y polen de pino y se dejó a temperatura ambiente por 7dias. Después de pasados los 7 días y teniendo ya los clones del THR seleccionado, se extrajo nuevamente un solo tipo de THR el que se traspasó a un medio Agar Sabouraud (medio solido) y se dejonuevamente a temperatura ambiente durante 7 días con el objetivo de hacer un cultivo axénico.
Con respecto a los resultados obtenidos, el cultivo axénico no tuvo el producto esperado ya que por una mala realización del practico los medio Agar Sabouraud se vieron contaminados con hongos ambientales los que proliferaron en mayor cantidad en el medio solido que los THRs, es por eso que se recomiendarealizarlo en una cabina de flujo laminar en donde el flujo de aire mantiene siempre estéril el medio y se logra un cultivo de forma correcta.
En conclusión toda falla en el proceso tiene de alguna u otra manera repercusiones en el producto, sin embargo el conocer los factores que llevaron al error dan pie a realizar las precauciones convenientes a la hora de efectuar nuevos cultivos.

IntroducciónEn la actualidad, los aceites de pescado como las anchoas, jurel, atún, sardinas, entre otros, son una fuente comercial de ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs). Los PUFAs son esenciales para un crecimiento y desarrollo normal así como para diversas funciones fisiológicas, por ende su deficiencia puede producir el envejecimiento prematuro de las células y su posterior muerte.
Junto con losaceites de pescado el cultivo de microalgas fotótrofas son las principales fuentes comerciales de estos ácidos grasos poliinsaturados, sin embargo, la posible disminución de las poblaciones de peces comerciales y la  compleja tecnología necesaria para producir comercialmente microalgas han impulsado la investigación de posibles fuentes alternativas de ácidos grasos poliinsaturados. Algunas bacteriasson otro ejemplo de productores de PUFAs, sin embargo estas en sistemas de cultivo poseen una concentración muy baja para la estimada en una producción industrial.
Los Thraustochytridos (THRs) son microheterotrofos marinos y estudios recientes han demostrado que algunas cepas de estos pueden cultivarse para producir alta biomasa, que contiene cantidades sustanciales de lípidos ricos en PUFAs, loque lo convierte en una alternativa biotecnológica muy buena.
La incorporación de los THRs a la dieta de salmónidos en sustitución de los aceites de pescado es importante porque aumentan su sobrevivencia y permiten un buen desarrollo desde su estado larval, proporcionando altas cantidades de ácidos grasos incluyendo casi específicamente producción de DHA (ácido graso del tipo omega-3) lo que esnecesario para la mayoría de las especies cultivadas a través de la acuicultura.
Objetivos
Aislar un Thraustochytrido a partir de un cultivo en medio líquido.
Desarrollar un cultivo axénico de hongos marinos (THR).
Materiales y métodos
El cultivo líquido de Thraustochytridos que se realizó anteriormente en el laboratorio se dejó crecer a temperatura ambiente por 7 días.
Se tomó una placa...