Cultivos bacterianos

MEDIOS DE CULTIVO
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. La nutrición microbiana consiste en aportar a las células los ingredientes químicos que necesitan para la síntesis de monómeros, que son los componentes de las macromoléculas, que a su vez van a construirlas diferentes estructuras celulares.

El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. En la actualidad, se han preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes. Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de contener, como mínimo, carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y salesinorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer de dadores o aceptores de electrones para las reacciones químicas que tengan lugar. Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sinembargo, la preparación de estas sustancias para su aplicación a los medios de cultivo provocaban la pérdida de los factores nutritivos lábiles. Actualmente, la forma más extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona que, además, representa una fuente fácilmente asequible de nitrógeno y carbón ya que la mayoría de los microorganismos, que no suelen utilizar directamente lasproteínas naturales, tienen capacidad de atacar los aminoácidos y otros compuestos más simples de nitrógeno presentes en la peptona. El medio de cultivo químicamente definido se prepara añadiendo cantidades precisas de compuestos orgánicos e inorgánicos puros a un volumen conocido de agua destilada. Se conoce la composición exacta de cada uno de los componentes de este tipo de medios de cultivos.K2HPO4 7g KH2PO4 2g (NH4)2SO4 1g MgSO4 0,1 g CaCl2 0,02 g Glucosa 4-10 g Elementos traza 2-10 g (Fe, Co, Mn, Zn, Cu, Ni, Mo) Agua destilada 1000 ml pH 7

Medio definido para Escherichia coli

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial, además de los nutrientes básicos, se deben controlar una serie de condiciones: consistencia adecuada (líquido o sólido),temperatura, humedad, presión de oxígeno, pH, entre otros. Además, un medio de cultivo debe contener los factores de crecimiento necesarios (vitaminas y cofactores de enzimas) y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. Partiendo de un medio líquido podemos modificar su consistencia añadiendo productos como albúmina, gelatina o agar, que son agentes solidificantes con los queobtendríamos medios en estado semisólido o sólido. Actualmente los medios sólidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad, pero hay también gran cantidad de medios líquidos cuyo uso está ampliamente extendido en el laboratorio. El agar es el agente soldificante por excelencia y más utilizado en estudios de rutina en el laboratorio. El agar es un polisacárido complejo extraído de las algasrojas que se presenta en estado líquido a temperaturas superios a 45 °C y se solidifica al enfriarse a temperaturas inferiores a 45 °C. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él. La Gelatina es una proteína que solidifica a los 25 °C, y también es utilizado como otro agente solidificante. Sin embargo, su uso no estáampliamente extendido debido a que tiene el inconveniente de que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusión de este solidificante y de que otros tienen la capacidad de licuarla (la consumen). Por otro lado, muy a menudo se añaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas actividades metabólicas (por ejemplo, la...