Cultivos Sumergidos
Cultivos de líneas celulares en suspensión: suspensión:
Conjunto de células homogéneas o agregados celulares, suspendidas en medio líquido que constituyen una línea celularCultivo de clones en suspensión :
Cuando la línea celular se establece a partir de una sola célula
Obtención
Disgregación mecánica de callos friables
Para obtener células finamentesuspendidas son necesarios varios repiques y generaciones celulares
Tamiz (300 a 500 µm)
Callo friable
• • • • • • • • • • • • • • • • •• • • • • • • • • • •• • • • • • • •
1st repique
2ndRepique
Las células en suspensión son generalmente similares a células de tipo parenquimáticas: •presentan grandes vacuolas • poco citoplasma • están rodeadas de una pared celular fina •Gran tamaño(10-100µM) •Tienden a la formación de agregados •Presentan crecimiento lento •Presentan baja demanda de oxígeno pero no pueden vivir en anaerobiosis
A filamentous cell of a shoot cell suspensionof Erythrina
A filamentous septated cell dividing actively at one end to form an aggregate
A giant filamentous cell (G) Note the difference in the size between the giant cell, the smallergenerally occurring filamentious cells and the isodiametric cell.
A giant (G) and normal (N) isodiametric cell in a shoot cell suspension culture of Erythrina.
Los agregados de cientos de células sonel resultado de la no dehiscencia luego de la división celular. Se pueden presentar inconvenientes como la generación de gradientes en el suministro de nutrientes.
A typical aggregate of small,viable, isodiametric cells of a shoot cell suspension culture of Erythrina which occurs in the the exponential and linear growth phases
Agitación
entre 70 y 150 rpm
• asegurar la aireación •evitar la ruptura de las paredes celulares rígidas debido al alto porcentaje de celulosa y al gran tamaño de las células vegetales (de 10 a 100mm).
formas de cultivar suspensiones
Cultivos en...
Regístrate para leer el documento completo.