cultivos

El medio de cultivo
El cultivo celular se realiza:
en medios artificiales mezcla de -componentes purificados
-ó soluciones orgánicas complejas
en interior de instrumentos q. mantienen lascondiciones físicoquímicas adecuadas
sobre soportes o recipientes q. los contienen y aislan del medio
exterior
Medio de cultivo formado:
1. la naturaleza del sustrato o fase donde crecen las células
2.las condiciones físico-químicas y fisiológicas del medio
3. la naturaleza y composición de la fase gaseosa
4. las condiciones de incubación, s/t humedad y temperatura

1. El sustrato de cultivo“dependiente o independiente de anclaje”

1.1. Materiales usados como sustrato
a. Vidrio.
b. Plástico desechable.
c. Microsoportes ("microcarriers") .
d. Otros sustratos artificiales.
f. "Feederlayers".
g. Matrices tridimensionales.
h. Sustratos no adherentes.
i. Interfases líquido-gel o líquido-líquido
j. Haces microcapilares permeables

1.2 Recipientes de cultivo. plástico desechable* placas de Petri (ventiladas)
* multiplacas.
* frascos de Roux * "roller bottles"

2. La fase gaseosa
Oxígeno
Dióxido de carbono
3. Propiedades físicas
Las características del medio: pH,osmolaridad, Tª, viscosidad y T superficial
pH y capacidad tamponadora
* pH óptimo 7.4
fibroblastos entre 7.4 y 7.7
células transformadas 7.0 a 7.4
células epidérmicas 5.5
* indicador de pH elrojo fenol: - color rojo a pH 7.4
- naranja a pH 7.0
- amarillo a pH 6.5
- azul-rojo a pH 7.6
- púrpura a pH 7.8
•El medio de cultivo debe estar tamponado, evitar cambios bruscos de pH
Osmolaridad•amplia tolerancia frente a la osmolaridad del medio,
•* Control mediante la determinación del punto de congelación ó
Temperatura
* tiene gran influencia en la tasa de crecimiento de las células•Influye en pH del medio
Viscosidad
* determinada por el contenido en suero
* tiene poca influencia sobre el crecimiento
* importante para evitar el daño celular
Tensión superficial
Tensió...