cultivos

Agar TSI
El Agar-hierro-triple azúcar es un medio de cultivo. Gracias a su composición es uno de los medios de cultivo más empleados para la diferenciación de enterobacterias según:
1. Fermenten o no glucosa.
2. Fermenten o no lactosa o sacarosa.
3. Produzcan o no ácido sulfhídrico.
4. Produzcan o no gas.
Correspondientemente las reacciones sobre agar TSI son:
1. Si la bacteria problemafermenta la glucosa, acidificará el medio haciendo virar a amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras que si no es fermentadora de glucosa, el medio permanecerá de color rojo.
2. Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el medio en su superficie volviéndolo de color amarillo, mientras que si no lo es, la superficie del medio continuará de color rojo.
3. Siproduce ácido sulfhídrico (debido a la reducción de las sales de hierro), se presentará un ennegrecimiento del tubo. La producción de sulfhídrico y el consiguiente ennegrecimiento pueden impedir ver la fermentación de la glucosa (fondo amarillo), pero este hecho implica directamente que la bacteria es fermentadora de glucosa.
4. Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la bacteriaes productora de gas.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano.
El tiosulfato de sodio es el sustracto necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio es la fuente de iones Fe3, los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro de color negro.El rojo de fenol es el indicador de PH y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, por fermentación de azucares se producen ácidos que sé que se detectan por el medio de indicador rojo de fenol el cual vira el color amarillo en medio acido.
El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrogeno el que reacciona luego una sal de hierro proporcionalmente el típico sulfuro de hierro colornegro.

Composición

Peptona



15g
Extracto de levadura
3g
Extracto de carne
3g
Proteosa de peptona
5g
Glucosa
1g
Lactosa
10g
Sacarosa
10g
Sulfato de hierro
0,20
Cloruro sódico
5g
Tiosulfato de sodio
0,30g
Rojo fenol
0,024g
Agar
12g



Kligler Hierro Agar
Medio de cultivo frecuentemente usado en microbiología de alimentos para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa y lactosa, y a la producción de ácido sulfhídrico.

En el medio de cultivo, la peptona de carne y la tripteína, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el citrato de hierro yamonio, es la fuente de iones Fe 3+, los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y  producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El agar es el agente solidificante.
Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo enmedio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno el que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Peptona de carne
13.0
Suspender  54.8 g del polvo por litro de agua destilada. Mezclar bien y calentar con agitación frecuente, hervir 1 o 2 minutos hasta disolución total.Llenar hasta la tercera parte de los tubos de ensayo. Esterilizar a 121°C por 15 minutos.Enfriar en pico de flauta profundo.
Cloruro de sodio
5.0

Lactosa
10.0

Tripteina
10.0

Glucosa
1.0

Citrato de hierro y amonio
0.5

Tiosulfato de sodio
0.3

Rojo de fenol
0.025

Agar
15.0

pH final: 7.3 ± 0.2
Resultados

1-Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el...