Curva de calibración por fotocolorimetria
CURVA DE CALIBRACIÓN POR FOTOCOLORIMETRIA
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
MEDELLIN
2010-02-24
OBJETIVOS
*Conocer los principios básicos de colorimetría.*Hallar concentraciones de muestras de proteína.
*Determinar el espectro de absorción de un compuesto determinado.
* Realizar curva de calibración a partir de una muestra de albumina.METODOLOGIA
Reactivos y Materiales:
• Fotocolorímetro
• Reactivo de Biuret
• Solución de albumina (C=3mg/ml)
• Solución salina al 0.9%
• Muestras problema: Caseína, Suerosanguíneo, gelatina
Procedimiento:
RESULTADOS
1. Espectro de absorción de la Albumina
Tabla 1
|Espectro de absorción de la albumina |
|λ(nm) |ABS |
|420|0,161 |
|440 |0,172 |
|460 |0,181 |
|480 |0,282 |
|500|0,386 |
|520 |0,478 |
|540 |0,52 |
|560 |0,512 |
|580 |0,466 ||600 |0,399 |
|620 |0,326 |
Se puede observar que la longitud de onda de máxima absorbancia para esta solución es de 540nm. Esta longitudde onda es la que se utilizara en la preparación de la curva de calibración.
2. Curva de calibración
Concentración de la albumina: [pic] ( [pic]* [pic]
Tabla 2
Tubo |Solución patrón(ml) |solución problema (ml) |Solución Salina (ml) |Reactivo de Bureta (ml) |Absorbancia |Concentración mg/ml | |Blanco |- |- |2.0 |4.0 | | | |1 |0.1 | |1.9 |4.0 |0,015 |0,0075 | |2 |0.3 | |1.7 |4.0|0,048 |0,225 | |3 |0.5 | |1.5 |4.0 |0,091 |0,375 | |4 |0.7 | |1.3 |4.0 |0,144 |0,525 | |5 |0.9 | |1.1 |4.0 |0,153 |0,675 | |6 |1.2 | |0.8 |4.0 |0,233 |0,9 | |7 | |0.5 |1.5 |4.0 |0,084 |0,33 | |8 |...
Regístrate para leer el documento completo.