Curva De Calibracion

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO
Facultad de Estudios Superiores Cuautitlan
Química Farmacéutica Biológica
BIOFARMACIA

GRUPO: 2852

Reporte
“CURVA DE CALIBRACION”

ALUMNOS:
• Gutiérrez Mendoza Beatriz
• Lucas Chávez Guillermo
• López Reyes Fernando Antonio
• Ramírez Lynn José Rodrigo
• Torres Botello José Raúl






OBJETIVOS:

➢ Conocer laforma de calibración y manejo del espectrofotómetro, para obtener resultados confiables en este tipo de instrumentos.
➢ Aplicar los conocimientos teóricos adquiridos para efectuar adecuadamente el análisis de resultados en una curva de calibración.


INTRODUCCIÓN:

Las curvas de calibración o estándares implican el uso de instrumentos ópticos y/o electrónicos para las mediciones, no delconstituyente como tal, sino de alguna propiedad (absorbancia, potencial, fluorescencia, área de pico, etc.) la cual puede ser atribuida al analito de forma directa o indirecta.

Se preparan diluciones de un reactivo estándar concentrada (stock) de la misma naturaleza del analito a determinar a la muestra, en un intervalo de concentraciones en el que se supone se halla la concentración delanalito en la muestra o en la (s) dilución (es) de esta. Se colocan en el instrumento de medición y se obtiene una respuesta P para cada dilución del estándar y la muestra.

Los resultados se grafican P= f(concentración de cada dilución del estándar) suponiendo una respuesta lineal y proporcional a la concentración del analito, ya que muchos instrumentos tienen ese tipo de respuesta (la inspeccióngrafica nos dará la seguridad de esto), se efectúa la regresión lineal, para determinar la mejor la recta que exprese mejor el comportamiento de la misma.

La interpolación de la señal de la muestra (o su dilución) en la recta permita conocer la concentración de esta

Los valores de la recta deben ser corregidos con el valor de un blanco reactivo que contiene todas las sustancias presentes enlos sistemas, acepto la sustancia que da la señal en concentraciones iguales 1.

CURVAS DE CALIBRACIÓN
DEFINICIÓN:
Son las relaciones funcionales existentes entre la propiedad medida por el método de análisis y la
“concentración” de analito en estudio.
APLICACIÓN DE LAS CURVAS
DE CALIBRACIÓN
Cuando no conozco de antemano la relación de la respuesta obtenida con respecto a la señal medida.- Cuando se desea eliminar el sesgo de un método de análisis
- A partir de los resultados, de la propiedad medida para la muestra problema, por INTERPOLACIÓN en la “curva” se obtiene la “concentración” del problema.
PROCEDIMIENTO DE
CALIBRACIÓN Y MEDICIÓN
- A partir de la determinación instrumental de la propiedad medida “absorbancia” producida por soluciones
patrón, se determina la CURVADE MEJOR AJUSTE.
- Es importante incluir en la construcción de dicha curva una muestra “en blanco”.
PUNTUALIZACIONES:
1 - Es esencial que los estándares (patrones) cubran el intervalo completo de concentraciones requerido en
los análisis subsiguientes.
El análisis de regresión es una HERRAMIENTA ESTÁDISTICA que se usa para establecer la relación
funcional entre dos variables.
ANÁLISIS DEREGRESIÓN SUPONIENDO MODELO LINEAL
Expresión de la recta
y = β0 + β1X


DETERMINACIÓN DE PARÁMETROS:
A partir de los valores experimentales se procede a determinar los parámetros de la curva es decir “la mejor recta de ajuste”
- Idem pero minimizando la suma de las diferencias ortogonales a la recta estimada
- Idem pero minimizando la suma de los cuadrados de las diferencias de las abscisas(es decir las X)
CRITERIOS ESTADÍSTICOS
- Hallar β0 y β1 de manera de obtener los parámetros que hacen mínima la suma de los cuadrados de las diferencias de las ordenadas (valores de y prácticos).
- Los Xi son variables no aleatorias que se determinan sin error.
- Para cada nivel de las Xi realizada una serie de repeticiones sobre la misma se obtiene una distribución normal de la variable...