Curva patrón para la cuantificación de almidón

RESUMEN

Objetivo: Realizar una curva patrón para la cuantificación de almidón. Materiales & Métodos: Se prepararon seis soluciones con un volumen final de 2.0mL a partir de una solución stock de Almidón 1000µg/mL y una solución de sales. Posteriormente se depositaron 1mL de cada una de estas soluciones en tubos que contenían solución C (Yoduro de potasio y yodo), las absorbancias seleyeron a 650 nm. Como blanco se depositó 1mL de la solución de sales a un tubo que contenía la solución C. Resultados: las curvas patrón resultantes muestran un comportamiento de progresión lineal, Y= 0.0004X - 0.0028, con un R2 > 0.9. Conclusiones: La técnica de Yodo-Yoduro para la cuantificación de Almidón se reprodujo de manera muy eficiente en todos los grupos de laboratorio los cuales cada unocorrespondía a una réplica.

Palabras Clave: Amilosa, Amilopectina, Yodo, Regresión lineal.

ABSTRACT

Objective: To perform a standard curve for quantification of starch. Materials & Methods: We prepared six solutions with a final volume of 2.0ml from a stock solution of starch 1000μg/mL and a salt solution. Subsequently deposited 1mL of each of these solutions in tubes containingsolution C (potassium iodide and iodine), the absorbances were read at 650 nm. As a target was deposited 1mL salt solution to a tube containing solution C. Results: The resulting curves show a behavior pattern of linear progression, Y = 0.0004X - 0.0028, with R2> 0.9. Conclusions: Iodine-iodide technique for the quantification of starch was replicated very efficiently in all lab groups each ofwhich corresponded to a reply.

Keywords: Amylose, Amylopectin, Iodine, Linear regression.

INTRODUCCIÓN

El almidón es un polisacárido que constituye la más grande reserva de carbohidratos en todas las plantas mayores, y es comercialmente producido de las semillas, raíces y tubérculos. Este se compone por amilosa y amilopectina, dos polisacáridos que difieren en sus propiedades físicas; laamilosa es una molécula lineal que tiene exclusivamente enlaces α (1-4), la amilopectina son polímeros ramificados que además de los enlaces mencionados anteriormente, contienen enlaces α (1-6) (1).
Este polímero constituye una fuente económica para la producción de sueros que contienen glucosa o maltosa, usados en la industria de alimentos (2). Además de esto ha sido usado como sustrato de lafermentación microbiana para la producción de bioetanol y otros compuestos (3).

Gracias a su importancia biotecnológica, es necesaria la cuantificación del almidón, en cuanto a su consumo. Uno de los métodos más usados es basado en el desarrollo de color que resulta de la unión de yodo a las cadenas de almidón, formando una coloración azul que se cuantifica por medio de espectrofotometría (4).

Elobjetivo de la práctica fue realizar una curva patrón para la cuantificación de almidón mediante la técnica de yodo-yoduro de potasio.

MATERIALES Y MÉTODOS

Preparación de diferentes concentraciones de almidón: A partir de una solución stock de almidón de 1000 µg/mL, se prepararon las siguientes concentraciones completando a un volumen final de 2 mL, como se ver en la siguiente Tabla 1.Concentración de almidón (µg/mL) | Vol. solución concentrada almidón (mL) | Vol. solución de sales (mL) |
200 | 0.4 | 1.6 |
400 | 0.8 | 1.2 |
500 | 1 | 1 |
600 | 1.2 | 0.8 |
800 | 1.6 | 0.4 |
900 | 1.8 | 0.2 |
Tabla 1. Preparación de las soluciones mixtas con a una concentración determinada de Almidón.
Fuente: Manual de laboratorio de procesos biotecnológicos
* Ver Anexo 1.Cuantificación con almidón: 1 mL de cada una de las soluciones preparadas de concentración conocida, se agregó a tubos que contenían 1 mL de solución C (22.2 g de yoduro de potasio, 1.1 g de yodo y 500 mL agua destilada) y posteriormente se agregaron 2 mL de agua destilada.
Se llevo a cabo la lectura de absorbancia a 650 nm en el espectrofotómetro tomando como blanco una solución con 1 mL de sales...