Daño A La Vacuola
Nuestro principal objetivo es el de observar los cambios de un vegetal según el contacto que tenga con diferentes sustancias a diferente cantidad de las mismas comprendiendo así el comportamiento de las células y la resistencia que tiene frente a los distintos solventes en este caso el acetona y el alcohol.
MARCO TEÓRICO
Rompimiento CelularUna gran cantidad de productos de interés son intracelulares y para obtenerlos se precisa la desintegración de la célula para liberar su contenido al medio. Métodos DRÁSTICOS: Rompimiento total de la célula. SUAVES: alteración química de las cubiertas celulares, permeabilización que facilite la salida del producto. Temperatura. La selección de una u otra técnica dependerá las características del producto que se desea purificar, talescomo: •Resistencia a: • Medios alcalinos. • Solventes. • Detergentes. • Enzimas. •Temperatura • Esfuerzo de corte. La técnica utilizada determinará el tamaño de los desechos que se producirán.
Métodos No Mecánicos. Mecánicos.
Métodos Químicos: Choque osmótico. Permeabilización. Disolución lipídica. Tolueno 10 % de la biomasa Digestión enzimática. Enzimas que atacan la pared celularLisozima: ataca la capa de péptidoglucano de la pared celular. Tratamiento alcalino. Los métodos mecánicos implican someter a las células a una deformación en fase sólida o líquida. Los métodos no mecánicos utilizan reactivos que pueden ser químicos o enzimáticos, cuyo objetivo es romper o lisar la célula. Actualmente los métodos mecánicos son aplicados industrialmente, mientras que los no mecánicos seutilizan principalmente pequeña escala (laboratorio).
Métodos No-Mecánicos Pueden ser de dos tipos: •Agente químicos •Solventes orgánicos • Detergentes • Alcalis • Agua (shock osmótico) •Enzimáticos se trata de enzimas que permeabilizan en forma selectiva las membranas celulares, tales como lisozima, glucanasas, mananasas, etc. Los métodos no-mecánicos son fáciles de escalar, si uno necesita tratar 10veces más materia orgánica basta con adicionar 10 veces más reactivo químico o enzimático.
Métodos No-mecánicos Técnicas Permeabili -zación Enzimático Principios Permeabilización de la pared celular, lo cual produce el rompimiento de la Stress Suave Costos Caro Ejemplos Tratamiento de M. lysodeikticus célula con lisozima. Shock Osmótico Solubiliza- ción Disolución de Lípidos Ruptura Osmótica de la membrana Disolución de la membrana celular con detergentes Solventes orgánicos que disuelve la pared celular y también la Suave Suave Modera -do Barato Moderada- mente Caro Barato Ruptura de Células de Glóbulos Rojos. Rompimiento de bacterias con SDS. Rompimiento de levaduras desestabilizan con tolueno. Tratamien -to con álcalis Solubilización de la membrana por saponificación de los lípidos Fuerte Barato
PROCESO
Materiales
En la mesa del instructor:
· Soluciones de acetona y metanol
· Gradilla para tubos de ensayo
· Una remolacha
Procedimiento
1. Rotule seis tubos de ensayo de 1 al 6.
2. Añada 5 ml de las siguientes soluciones a los tubos de ensayo:
Tubo 1: metanol 1 %
Tubo 2: metanol 25 %
Tubo 3: metanol 50 %
Tubo 4: acetona 1 %
Tubo 5:acetona 25 %
Tubo 6: acetona 50 %
3. Corte seis pedazos de remolacha de 15 mm y colóquelos en los tubos de ensayo.
4. Luego de 30 min, remueva la remolacha y observe la intensidad de color para cada solución.
5. ¿Qué tubo mostró la mayor intensidad de color?
Es el 1 tubo con alcohol al momento de agitar el tubo de ensayo la dispersión del colorante fue más rápida
7. Agite cada tubo suavemente yobserve los resultados. ¿En qué tubos se observaron reacciones?
Las reacciones mas contundentes se observaron en los tubos que contenían el alcohol
8. Basado en lo que se observó en los tubos de ensayos (refiriéndose a los tubos 1 - 6 y A - F), ¿cómo afecta la acetona a la membrana?
Esta sustancia es un soluto que permite que se disuelva el betabel pero a diferencia del alcohol el...
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