david


El analisis de ADN o ARN requiere la deteccion de una secuencia determinada entre otras muchas secuencias presentes en una muetra de celulas o tejido.
Cuando se a naliza ADN genomico , elproblema es encontrar y examinar el fragmento de adn de interes entre una mezcla compleja de ADN genomico que contiene varios millones de fragmentos de ADN. Con las muestras de ARN el problema es esdetectar y medir la cantidad y la calidad de una ARNm especifico en una muestra de ARN de una tejido en el que el ARN de interes puede representar solo 1/1.000 o menos del total de los transcriptos deARN.para esto se ha diseñado muchas tecnicas de naalisis molecualr que son utilizadas dependiendo del grado de especificidad el cual se requiera en el analisis posterior.



La pcr puede amplificarselectivamente una sola molecula de ADN o ARN varios miles de millones de veces en pocas horas , y ha revolucionado el diagnostico y el analisis molecular de enfermedades geneticas y de mas . La PCRconsiste en una amplificacion enzimatica de un fragmento de ADN ( Diana) localizado entre dos oligonucleotidos tambien llamado cebadores . Estos cebadores estan diseñados de forma que uno de ellos escomplementario a una cadena de una melecula de ADN en uno de los lados de la secuancia diana , y el otro es complementario a la otra cadena de la molecula de ADN en el lugar opuesto de la secuanciadiana . Dado que el extermo 3( prima de cada oligonucleotido cebador apunta hacia la secuencia diana para amplificarla y debido a que los cebadores la flaquean , estos se extienden por sientesis de lasecuancia entre ellosmediante ADN polimerasa . Los cebadores estan orientados de forma qe inician dos nuevas cadenas de ADN complementarias entre si, formando una segunda copia de la secuencia dianaoriginal. Repetidos ciclos de desnaturalizacion con calor , hibridacion de loscebadores y sintesis enzimatica de ADN dan como rersultado una amplificacion exponencial de la secuencia diana de ADN que...