Dbt neonatal

TINCION DE GRAM

(+) (-)

LA TINCIÓN DE GRAM
protocolo:
• Un toque del asa sobre la colonia bacteriana se debe disolver sobre una gota de agua y extender como unacapa fina sobre un portaobjetos. Dejala secar.
• Sumergir el porta en una solución de cristal violeta 30 segundos.
• Lavar cuidadosamente con mucha agua.
• Suemergir el porta en ioduro de Gram 30segundos. Estabiliza el cristal violeta, todas las bacterias en la preparación permanecen de color púrpura o azul.
• Lavar cuidadosamente con mucha agua.
Aplicar decolorante hasta que desaparezcatodo el color que puedas.Decolora algunas bacterias (las Gram negativas) y no otras (las Gram positivas).
• Lavar cuidadosamente con mucha agua.
• Sumergir en una solución de Safranina 30 segundos.Las bacterias gram positivas ya están teñidas con cristal violeta y permanecen de color púrpura. Las bacterias gram negativas se tiñen de color rosa. Lavar cuidadosamente con mucha agua.
Secar conaire de un secador de pelo.
• ¿Se trata de bacterias gram positivas o negativas?
• ¿Cuál es la morfología (bastones, cocos, espirales, pleomórficas [forma variable], etc.)?
• ¿Aparecen las célulasen forma separada o formando cadenas, racimos, pares, etc.? y
• ¿De que tamaño son las células?
Tinción diferencial
1. Cristal violeta durante 2'
2. Retirar el cristal violeta
3. Añadirinmediatamente lugol durante 1 '
4. Lavar hasta decoloración con alcohol y luego con agua
5. Teñir con safranina durante 30'' a 1'
6. Lavar con agua

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GRAM (+)


1. PRUEBA DE LA CATALASAObjetivo: Separar la Flia. Micrococacceae (catalasa +) de los Géneros Streptococcus y Enterococcus (catalasa-).
Fundamento: La enzima catalasa descompone el peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua yoxígeno bajo la
fórmula 2 H2O2----2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, que es
un producto final del metabolismo aerobio de los azúcares.
Procedimiento:...