Deferentes Pruebas Serologicas

LAS DIFERENTES PRUEBAS SEROLÓGICAS
En el momento de realizar pruebas diagnósticas de enfermedades
infectocontagiosas hay dos posibles vías principales: pruebas directas encaminadas a la
detección del agente etiológico o de parte de su ADN en el animal afectado, o pruebas
indirectas que demuestran que el sistema inmune del individuo afectado ha estado en
contacto con el agente encuestión. Cualquiera de los tipos de prueba aporta una
información diferente y las pruebas aplicables varían en específidad y sensibilidad. En
lo presente nos centramos principalmente en las pruebas que permiten la detección de
anticuerpos aunque algunas técnicas son parecidas para la detección de anticuerpos y
antígeno.

1- Precipitación/

La adición de un antígeno soluble a una solucióncon anticuerpos homólogos resulta
en la formación de complejos inmunes que precipitan de la solución. Cuando se
aumenta la cantidad de antígeno que se añade se forman cantidades variables de
complejos y con esto de precipitado, obteniendo la mayor cantidad de complejos cuando
la proporción de antígeno y anticuerpo en la solución es equivalente o óptimo. Esto se
aprovecha en los testserológicos de inmunoprecipitación como por ejemplo para la
identificación de diferentes estreptococos.

2- Inmuno difusión Cuando esta técnica se utiliza en un medio semisolido como los geles de agar en
los cuales los dos componentes el antígeno y el anticuerpo migran a través del agar
hasta que se encuentren y precipitan en el lugar donde su proporción es optima, se trata
deinmunodifusión. Este método permite identificar anticuerpos y antigenos
desconocidos y comparar antígenos parecidos entre si (método de Ouchterloney).
También permite cuantificar el antígeno presente en una solución determinada. Para ello
se pueden obtener resultados mas exactos mediante inmunodifusión radial (el antígeno
se encuentra en pequeñas indentaciones y difunde por un gel que contiene unaconcentración conocida de antisuero, de modo que diámetro del anillo de precipitación
que se forma es proporcional a la cantidad de antígeno.

3- Inmunoelectroforesis

En líquidos que contienen mezclas de antígeno se puede aplicar primero una
electroforésis para separar los antígenos presentes y luego la inmunodifusión para su
identificación.

4- Aglutinación
Anticuerpospueden reaccionar con un antígeno determinado y luego
interconectar entre ellos o diferentes componentes antígenos presentes por ejemplo en la
superficie de una bacteria. Este proceso resulta en la aglutinación que es visible
macroscopicamente y es un instrumento útil en la identificación de bacterias, hongos e
incluso protozoos medinte antisueros especificos. Del mismo modo utilizando unantígeno purificado especifico se puede demostrar la presencia de anticuerpos frente a
este antígeno en una muestra. Ambos métodos se realizan con frecuencia de forma
directa en un porta y estan conocidos como Aglutinación en porta. Ejemplos son la
aglutinación en porta para la detección rápida de anticuerpos frente a diferentes
Mycoplasma spp. o Salmonella spp. así como el test de rosabengala para la detección
de anticuerpos frente a Brucella abortus. Para determinar anticuerpos frente a
Leptospira spp. se utilizan cultivos vivos de Leptospira en una aglutinación en porta
bajo el miscroscopio en campo obscuro. Para cuantificar anticuerpos mediante
aglutinación se puede utilizar el test de aglutinación en tubo, diluyendo el antisuero en
pasos de dos en dos (a veces dificílde interpretar y requeriendo muestras seriadas). En
el caso de antígenos que se pueden fijar sobre glóbulos rojos (de forma pasiva o
mediante tratamiento químico), por ejemplo de ovejas, la hemaglutinación en placas de
microtitración se puede utilizar para cuantificar anticuerpos (la mínima concentración
que aún aglutina los glóbulos rojos).

5- Fijación de complemento (CFT)...