dengue 4

Revista Cubana de Medicina Tropical. 2014;66(3):424-432
ARTÍCULO ORIGINAL

Obtención de la sublínea celular CLA-HT. Estudio de su
sensibilidad para el aislamiento y multiplicación de los
virus del dengue

Obtainment of CLA-HT cell subline and study of its
susceptibility for the isolation and multiplication of the dengue
virus

Lic. Luis Morier Díaz,I MSc. Dámasa Irene López-Santa Cruz,II
Dra. C.Mayling Álvarez,I Téc. Yamira Caballero Lorenzo,I Lic. Daineya
Mendoza LlanesI
Laboratorio de Cultivos Celulares. Departamento de Virología. Instituto de
Medicina Tropical "Pedro Kourí"(IPK). La Habana, Cuba.
II
Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología (CPHEM). La Habana,
Cuba.
I

RESUMEN
Introducción: en el diagnóstico de dengue es importante la determinación del
serotipoviral. A pesar de existir otros métodos, el aislamiento viral en cultivos de
células y la identificación por la técnica de inmunofluorescencia siguen siendo muy
utilizados. Por lo tanto, la búsqueda de sistemas celulares más sensibles ha sido un
tema reiterado durante muchos años para el virus dengue y otros agentes.
Objetivo: obtener una sublínea celular a partir del clon CLA-1 (Aedespseudoscutellaris) que crece a 28 oC, capaz de multiplicarse a 33 oC (CLA-HT) y
evaluar su utilidad para el aislamiento y la identificación de los virus del dengue.
Métodos: a partir del clono CLA-1 de la línea celular AP-61(Aedes
pseudoscutellaris) se obtuvo por selección una cepa o sublínea celular CLA-HT
capaz de crecer a 33 °C. Se estudió su sensibilidad para la multiplicación de los
4 serotipos del virus deldengue y su eficiencia para el aislamiento directo de sueros
de pacientes en fase aguda de la enfermedad, ambos comparativamente con la
línea C6/36HT (A. albopictus).

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Resultados: la sublínea CLA-HT permitió el crecimiento de los 4 serotipos del virus
dengue aunque para algunos requirió más tiempo que la C6/36 HT.Para el
aislamiento a partir de muestras de sueros colectadas de individuos en fase aguda,
la sublínea CLA-HT detectó el virus en el 40 % de las muestras, mientras que
C6/36 detectó el virus en el 50 %.
Discusión: CLA-HT es capaz de detectar todos los serotipos del virus dengue a
partir de las 96 horas pos inoculación, por lo que es útil para la investigación como
sistema alternativo y sueficiencia de aislamiento directo es buena para aplicar en
grandes brotes. Además, la principal ventaja es que es posible utilizarla para
proporcionar una respuesta rápida a situaciones emergentes en laboratorios de
escasos recursos, ya que no precisa de condiciones de incubación con CO2.
Conclusiones: se obtuvo una sublínea CLA-HT a partir de la línea CLA-1 capaz de
crecer a 33 oC, la cual detecta los 4serotipos del virus dengue. Su eficiencia de
aislamiento es ligeramente menor que la sublínea C6/36 HT, pero se puede utilizar
como sistema alternativo para el aislamiento de los virus dengue sobre todo en
laboratorios con bajos recursos que no cuenten con condiciones óptimas de
incubación.
Palabras clave: virus dengue, sublínea celular, detección viral.

ABSTRACT
Introduction: the identificationof viral serotypes is an important issue for dengue
diagnosis. Despite the existence of other identification methods, the viral isolation
in cell cultures and determination by immunofluorescent technique remain as the
most used. Therefore the search for more sensitive cellular systems has been a
repeated topic during many years for dengue virus and other agents.
Objective: to obtain a cellsubline from CLA-1 clone (Aedes pseudoscutellaris), that
grows at 28 °C, capable of multiplying at 33 °C (CLA-HT)and to evaluate its
usefulness for Dengue virus isolation and identification.
Methods: by using a CLA-1 clone of the AP-61(Aedes pseudoscutellaris) cell line, it
was possible to obtain a strain or cell subline CLA-HT capable of growing at 33 oC
(CLA-HT) through a temperature selection...